Mitozdan çıkış mekanizmasında yeni mekanizmalar

Mitozdan çıkış mekanizması, mitozdan çıkışı düzenleyen bir G-protein sinyalleşme sürecidir. Bu süreç, doğru hücre bölünmesi için sıkı bir şekilde düzenlenmelidir. Bu tezin amacı, mitozdan çıkışı kontrol eden yeni mekanizmaları karakterize etmektir. Bu amaçla, maya hücresi olan Saccharomyces cerevisiae'de birbirinden bağımsız fakat ilişkili iki mekanizma incelenmiştir. İlk mekanizma, yavru kortekste tomurcuk bölgesi seçim proteini Bud14'ün fosfataz Cdc14 üzerindeki beklenmeyen bir etkisi üzerinedir. Cdc14, mitozdan çıkışı tetikleyen ana protein fosfatazdır ve anafaz başlangıcından sonra mil pol gövdelerine (SPB) yerleşir ve mitozdan çıkışla birlikte SPB'lerden kaybolur. Verilerimiz, BUD14'ün yokluğunda veya Bud14'ün protein fosfataz 1'e (bud14-F379A) bağlanamaması durumunda, Cdc14'ün Mil Pol Gövdesinde (SPB) daha uzun süre kaldığını göstermektedir. Cdc14'ün SPB lokalizasyonu, Cdc14 salım mekanizmaları FEAR ve MEN'nin yanı sıra mitotik çıkış inhibitörü protein Bfa1'e bağlıdır. Bu nedenle, Bud14-Glc7, Cdc14'ün SPB lokalizasyonunu kontrol eden mekanizmanın bir parçasıdır. Tezin ikinci kısmı, Cdc36'nın mitotik çıkışı etkilediği mekanizmaları araştırır. Cdc36, mRNA regülasyonu ve translasyonunda çeşitli mekanizmalarda rolleri olan CCR4-NOT kompleksinde bir bileşendir. Verilerimiz, cdc36-16 mutantının mitozdan çıkış sorununu kurtardığını göstermektedir. Anafaz başlangıcından mitotik çıkışa kadar senkronize hücre döngüsü sırasında WT ve cdc36-16 hücrelerinin RNAseq analizini gerçekleştirdik. Birçok hücre döngüsü ile ilgili genin, cdc36-16'da farklı şekilde düzenlendiği bulundu. Bu nedenle verilerimiz, Cdc36'ya bağlı ifadenin mitozdan çıkış için önemli olduğunu göstermektedir. Bu tezde, mitotik çıkış kontrolünde yer alan yeni proteinleri (Bud14-Glc7 ve Cdc36) keşfettik. Bu proteinlerin daha yüksek ökaryotlarda benzer işlevlere sahip olabileceğini tahmin ediyoruz.