Penisilin g açilaz saflaştırılması için yeni destek materyali

Penisilin G açilaz (EC 3.5.1.11), endüstriyel süreçlerde yarı sentetik penisilinlerin üretiminde kullanılmaktadır. Penisilin açilaz enzimininsaflaştırılması, yarı sentetik penisilinlerin ve sefalosporinlerin üretimine imkânsağlar. Sunulan çalışmada, penisilin açilaz saflaştırılması için tekrar kullanılabilirmakrogözenekli kriyojel biyoafinite kromatografi adsorbenti hazırlanmıştır.Kriyojeller makrogözeneklere sahiptir. Bu özellikler, kriyojellerin nano-mikroölçek aralığında herhangi bir difüzyon sorunu olmaksızın kullanımına olanaksağlamaktadır. Çalışmada; ilk olarak, 4-aminoantipirin, metakroil klorür ilereaksiyona sokularak metakroil amidoantipirin (MAAP) monomeri sentezlenmişve elde edilen yapı FTIR ile karakterize edilmiştir. Daha sonra; MAAP ve 2-hidroksietilmetakrilat (HEMA) komonomerleri polimerleştirilerek poli(HEMAco-MAAP) kriyojel kolon sentezlenmiştir. Hazırlanan kriyojellerin spesifik yüzeyalanı 25.8 m2g-1, şişme değeri % 1463.97 olarak bulunmuştur. Çalışmanın ikinciaşamasında ise MAAP içeren kriyojel kolonlara sulu çözeltilerden ve doğalkaynaklardan penisilin açilaz adsorpsiyonu incelenmiştir. Poli(HEMA-co-MAAP)kriyojellerin maksimum adsorpsiyon kapasitesi 190.2 mgg-1 (pH 5.0 ve 2 saat)olarak bulunmuştur. Doğal kaynaklardan penisilin açilaz saflaştırılması hızlıprotein sıvı kromatografisi (FPLC) ile gerçekleştirilmiştir. Penicilliumchrysogenum NRRL 1951, Penicillium crysogenum 807 ve Penicilliumpurpurogenum 455 ham ekstraktlarından penisilin açilaz saflaştırma faktörü sırasıile 17.89, 54.9 ve 10.0 olarak bulunmuştur. Kriyojellerden penisilin açilazdesorpsiyonu, 1 M NaOH kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Tekrarlanan 6adsorpsiyon-desorpsiyon döngüsü sonucunda kriyojellerin adsorpsiyonkapasitesinde önemli bir azalma olmadığı belirlenmiştir. Sonuç olarak;poli(HEMA-co-MAAP) kriyojel, penisilin açilazın hızlı, ucuz ve spesifiksaflaştırılması için uygun kullanım potansiyeline sahiptir.