Ras aktif hücrelerde kaspazların apoptoz üzerine etkileri

RAS AKT F HÜCRELERDE KASPAZLARINAPOPTOZ ÜZER NE ETK LERÖZETBu tez kapsamında, Cis-platin ile stimüle edilen insan-U2OS (osteosarkoma)hücrelerindeki morfolojik ve biyokimyasal değişimler, kaspaz-3 ve kaspaz-9enzimlerinin apoptotik mekanizma üzerine etkileri incelenmiştir. Bunun yanı sıra,çeşitli ekstrasellüler proteinler (fibronektin, kollajen ve trombospondin-1) ileaktive edilen integrin reseptörlerinin U2OS hücre apoptoz mekanizmasındaki rolüçok yönlü olarak araştırılmıştır.Mitokondriyal aktiviteye yönelik yapılan sitotoksik incelemeler, Cis-platinin IC50değerinin 4 µM olduğunu göstermiştir. Sitotoksik etkisi bulunmayankonsantrasyon aralığı kullanılarak yapılan morfolojik ve nüklear boyamaçalışmaları ise, apoptotik hücre zar bütünlüğünün bozulduğunu, hücre zarındatomurcuklanmaların meydana geldiğini, nüklear apoptotik değişimlerin ve DNAparçalanmasının başladığını göstermiştir. Kaspaz-9'un kaspaz-3'e oranla Cis-platin ile stimüle edilen U2OS apoptoz mekanizmasında anlamlı bir etkiye sahipolduğu flurosan-işaretleme yöntemi ile bulunmuştur. Farklı integrinlerinaktivasyonuna bağlı olarak da apoptotik osteosarkoma hücre oranında değişimlergözlenmiştir. Özellikle fibronektine (α4β1, α3β1, αVβ3) bağlanan hücreler deapoptoz oranının, diğer proteinlere oranla daha düşük olduğu tespit edilmiştir.Cis-platin ile DNA hasarı oluşturularak U2OS hücrelerinde apoptozmekanizmasının moleküler düzeyde araştırılması ve metastazda önemli olanintegrin reseptörlerinin nasıl etkilendiğinin tespit edilmesi çeşitli tedaviyöntemlerinin geliştirilmesine olanak sağlayacağı düşünülmektedir.Anahtar Kelimeler : kaspaz, apoptoz, kaspaz inhibitörleri, cis-platin