Saccharomyces cerevisia invertazın karboksillenmiş çok duvarlı karbon nanotüpler üzerine immobilizasyonu

Endüstriyel bir enzim olan invertaz, sükrozun hidrolizini katalize eden bir glikoproteindir ve gıda sanayisinde invert şeker üretiminde kullanılmaktadır. 1:1 oranında glukoz ve fruktoz karışımından oluşan invert şeker, granüler sükrozdan daha tatlı ve daha çözünür olmasından dolayı gıda sanayisinde önemli bir bileşendir. Özellikle şeker üreticilerinin yüksek viskoziteli solüsyonlarda şekerin kristalleşmesini geciktirmek amacıyla kullanılmaktadır. Bu tez çalışmasında, Saccharomyces cerevisiae invertazın immobilizasyonu, ticari immobilizasyon martiksi olan karboksillenmiş çok duvarlı karbon nanotüp üzerine adsorpsiyon yöntemiyle gerçekleştirildi. İmmobilizasyon koşulları optimize edilerek, % 100 immobilizasyon verimi ve % 177.69 aktivite verimi elde edildi. Enzimin optimum pH'ı (4.5) ve optimum sıcaklığı (55°C) immobilizasyon sonrasında değişmemiştir. Ayrıca serbest ve immobilize enzim için kinetik sabitleri Linereaver-Burk grafiği kullanılarak belirlendi. Substrat olarak sükroz kullanıldığında serbest ve immobilize enzim için Km değerleri sırasıyla 215.5 mM ve 140.9 mM olarak hesaplanırken, Vmax değerleri ise sırasıyla 0.0339 µmol/mg.dk ve 0.0481 µmol/mg.dk olarak hesaplandı. İmmobilize enzim, peş peşe tekrarlanan yirmi kullanım sırasında ve yirmi günlük depolama sırasında, başlangıç aktivitesini kaybetmemiştir. 150 rpm çalkalama hızındaki bir orbital çalkalayıcılı ve ısıtmalı bir inkübatörde, optimum koşullarda (pH 4.5 and 55 °C), immobilize enzim kullanılarak sükrozun hidrolizi 6 saat boyunca izlendiğinde, hidrolizin 4 saatte tamamlandığı anlaşıldı. Sonuç olarak, bu tez çalışmasında elde edilen karboksillenmiş çok duvarlı karbon nanotüp üzerine immobilize Saccharomyces cerevisiae invertazın, invert şekerin endüstriyel üretiminde kullanılabileceği söylenebilir.