İzole meme kanseri kök hücreleri ve MCF-7 meme kanseri hücrelerinde otofaji ve apoptoz bakımdan tamoksifen etkisi

Kanser kök hücre hipotezi, kanserin kendini yenileme, tümör gelişimi ve farklı hücre tipine farklılaşma kapasitesi gibi kök hücre özellikleri olan bir hücre grubu tarafından başlatıldığını vurgulamaktadır. Kanser kök hücrelerin ayrıca uygulanan tedavi yaklaşımlarında oluşan dirençten ve tümörlerin tekrar oluşumundan sorumlu olabileceği düşünülmektedir. Bu nedenle, kanser oluşumu sırasında kanser kök hücrelerinin rolünü anlamak kök hücre biyolojisi ve kanser araştırmasında önemli bir hedef haline gelmiştir. Meme kanseri kadınlar arasında en yaygın görülen kanser tipidir. Meme biyolojisinin büyük miktarda kök hücreye ihtiyaç duymasından meme kök hücrelerinin meme kanserini başlatmada önemli bir rol oynadığı düşünülmektedir. Tümörün başlamasını ve gelişmesini sağlayan kanser kök hücrelerinin daha iyi şekilde karakterizasyonu, meme kanseri bilgi ve yönetimini geliştirmek için önemli bir adım gibi görünmektedir.Bu çalışmanın kapsamı, meme kanseri hücre hattı olan MCF-7 hücrelerinden CD44 ve CD24 hücre yüzey işaretleyicilerini kullanarak meme kanseri kök hücrelerini izole edip bu hücrelerin kemoterapiye karşı gösterdiği dayanıklılığı hormon tedavisine karşı da gösterip göstermediklerini test etmektir. Ayrıca, Tamoxifen uygulaması nedeniyle MCF-7 hücrelerinde otofaji indüksiyonu olduğu gibi meme kanser kök hücrelerinde de otofajik hücre ölümü mekanizması olup olmadığını gözlemek amaçlanmıştır. Bu amaçla, CD44+, CD24-/low meme kanseri kök hücreleri, MCF-7 hücrelerinden FACS sistemi ile ayrıştırıldıktan sonra üzerlerine kemoterapi calışmaları için Doxorubicin ve hormonal tedavi çalışmaları için de Tamoxifen ilaçları uygulanmıştır. Bu ilaçlar uygulandıktan sonra hücrelerin çoğalmasını gözlemek için MTS testi yapılmıştır. Ayrıca, izole edilmiş hücrelerde ve MCF-7 hücrelerinde apoptoz ve otofajik hücre ölümünü kontrol etmek için flow sitometri calışmaları gerçekleştirilmiştir. Bu testlere ek olarak otofajik çalışmalar için western blot ve LC3-GFP testleri uygulanmıştır. Çalışmanın sonucunda, izole meme kanseri kök hücrelerinin Doxorubicin'e biraz direnç göstermesine rağmen Tamoxifen'e karşı apoptoz ve otofajik bakımdan belirgin bir fark göstermediği gözlemlenmiştir.