In vivo applications of liposomal vaccines encapsulating single or dual pathogen-associated molecular patterns

Nükleik asit esaslı kalıp tanıma reseptörü (PRR) agonistleri umut verici adjuvanlar ve immünoterapötik ajanlardır. PRR ligandlarının kombinasyonu, farklı sinyal yolaklarını tetikleyip sinerjik immün aktivite sağlayarak bağışıklık tepkisini güçlendirmektedir ve antijene bağımlı T-hücre bağışıklık hafızasını etkileyebileceği düşünülmektedir. Bununla birlikte, nükleaz ataklar nedeniyle kısa dolaşım süresi, klinik performanslarını sınırlamaktadır. Lipozomlar, protein ve nükleik asit esaslı bileşikleri yüksek yükleme verimliliğine sahiptir. Bu çalışmada, bağışıklık uyarıcı ajanlar olarak kullanılmak üzere TLR9 ve TLR3 veya STING ligandlarıyla birlikte yüklenmiş lipozomal taşıyıcı sistemler geliştirmeyi ve in vivo uygulamalarda adjuvan ve immünostimülatör ajan olarak potansiyellerini değerlendirmeyi amaçladık. Lipozomal ikili nükleik asit içeren formülasyonların, sinerjistik doğal immün aktivasyonunu indüklemiş, ligandların hücre içine alım kapasitesini ve sitokin üretimini arttırmıştır. CpG ODN ve poly(I:C) birlikte yüklü lipozomlarla birlikte ovalbumin (OVA) yüklü kanser aşısı çalışmalarında, OVA'ya özgü Th1'e özgü bağışıklık cevapları ikinci enjeksiyondan sekiz ay sonra bile belirgin şekilde yüksek olduğu anlaşılmıştır. Aşılanmış hayvanlara OVA ifade eden tümör hücre hattı E.G7 verildiğinde, CpG ODN ve poly(I: C) birlikte yüklü lipozomal aşılar enjekte edilmiş farelerde, OVA'ya özgü sitotoksik hafıza T-hücrelerine bağlı olarak önemli derecede tümör büyümesinin yavaşladığı gösterilmiştir. İkinci çalışmamızda, lipozomal CDN ve TLR9 tedavisi ile fareye yerleştirilmiş melanoma tümörünün %80 oranında büyümesinin azaldığı ortaya çıkmıştır. Lipozomal formülasyonlarla tedavi edilen farelerde, antijene özgü Th1-yanlı bağışıklığın göstergesi olan IgG2c/IgG1 oranını arttırmıştır. Ayrıca, tedavi ile birlikte IFN-γ üreten CD8+ T hücrelerin önemli ölçüde yükseldiği ve M2 tipi makrofajların tümör yatağında azaldığı gösterilmiştir. Sonuç olarak, çift ligandların birlikte lipozoma yüklenmesiyle, tekli ligandların anti-tümör etkinliğini arttırmıştır. Üçüncü bölümde, antijenlerle birlikte CpG ODN yüklü lipozomal formülasyonlar ile FMDV ve Helicobacter pylori'e karşı aşılama, antijene özgü humoral yanıtın arttığı anlaşılmıştır. Ayrıca, lipozomal CpG ODN ile aşılanmış fareler helikobakter ile enfekte edildiklerinde, antijen varlığına bağlı Th1 ve Th17 bağışıklık yanıtları ile bakteriyel mide kolonizasyonunu azaltmıştır.