Contribution of toll-like receptors to mesenchymal stem cell differentiation and immunomodulation

Mezenkimal kök hücreler (MKH) değişik doku tiplerine ait hücrelerefarklılaşabilen ve kendini yenileme gibi çeşitli kök hücre özelliklerinin yanı sıraözgün karakteristiklere sahip çok potansiyelli öncül hücrelerdir. MKH, immündüzenleyici aktiviteyi uyarma ve yaralı dokuya göç etme özellikleri ile bilinmektedir.Bu tür farklı kapasiteleri, MKH'yi, diğer yetişkin kök hücrelerden farklı kılmakta veterapötik uygulamalarda kullanılabilinir hale getirmektedir.Toll-benzeri reseptörler (TBR), korunmuş mikrobiyal yan ürünleri tanımaktave başlıca doğal bağışıklık sistemi hücreleri yanı sıra endotel veya epitel hücreleritarafından da ifade edilmektedirler. Son bulgular, in vitro ortamda geliştirilenMKH'nin bu patojen tanıyıcı reseptörlerden bazılarını ifade ettiğini ileri sürmektedir.Görüşümüze göre, terapötik uygulamalarını genişletmek için TLR aracılıklı MKHaktivasyonu ile bu durumun hücre farklılaşma ve immün düzenleyici potansiyeliüzerine olan etkilerini araştırmak kritiktir.İlk olarak, kemik iliği kökenli MKH geliştirildi ve yüzey işaretçilerininifadesi (CD45, CD90 ve CD106) FACS ile protein seviyesinde; mesaj transkriptleri(CD11b, CD34, CD45, CD71, CD73, CD90 ve CD166) RT-PCR ile karakterizeedilmiştir. Hücre pasajları boyunca CD90 en bol işaretçi olarak bulunmuştur. TBRifade profillerinin RT-PCR ile belirlenmesinden sonra;TBR ulaklarının (TBR2, 3, 7 ve 9) MKH'nin adipojenik ve osteojenikfarklılaşmasına katkısı çalışılmıştır. Farklı hücre pasajlarında TBR3 en yoğunbulunan tip olarak bulunmuştur. Sıçan MKH'lerin adipojenik farklılaşmasının TBR2,TBR3 ve TBR7 ulaklarının varlığında hızlandığı bulunmuştur. Ayrıca, adipojenik veosteojenik değişimlere özgün işaretçilerin (adipojenez için LPL, PPAR-g ileosteojenez için ALP, OC?1 ve RUNX) mesaj düzeyleri RT-PCR ile analiz edilmiştir.TBR ulaklarının muamelesine karşılık olarak adipojenik işaretçilerin ifadesi artarkenosteojenik işaretçilerin ifadesi azalmıştır.Bu çalışmanın son kısmı fare MKH'leri ile gerçekleştirilmiştir. FareMKH'sinin immün uyarıcı/baskılayıcı potansiyelini belirlemek için fare MKH'sininimmün düzenleyici karakteri fare dalak hücreleri varlığında ve yokluğundaaraştırılmıştır. Verilerimiz, fare MKH'sinin TBR işlemesiyle, yalnız olarak veyadalak hücreleriyle ko-kültür ortamında, IL-6 ve IFN-? salınımının tanıklığında proinflamatuvarbir akışın başlatıldığını önermektedir.Sonuç olarak, MKH'nin TBR işlemesi öncelikle adipojenez olmak üzerehücrelerin farklılaşmasını artırmaktadır ve temelde bu hücreler immün uyarıcıdır.