Platelet-derived microparticles differentially regulate macrophage polarization

Trombosit microkesecikleri (PMP), trombositlerin aktifleşmesiyle salgılanırlar ve kan dolaşımındaki mikrokeseciklerin neredeyse %90'ını oluştururlar. PMPler kargolarından dolayı bağışıklık sistemini bastıran mikro ortamların üretimi ve tümör büyümesi ile ilişkilendirilmiştir. Ancak PMPler oto-bağışıklık hastalıklarının önlenmesi ve tedavisi için potansiyel adaylar arasında bulunmaktadır. Makrofajlar bağışıklık sisteminin anlaşılmaz hücrelerinden biridir. Makrofajlar M1 pro-inflamatuar ve M2 immunsupresif olarak kategorize edilmiştir. M1-M2 makrofaj kutuplaşmasına neden olan sinyaller tamamen anlaşılmış değildir. Ancak tedavi amaçlı makrofaj kutuplaşmasını indükleyen uyarıları anlamak önemlidir. Biz bu çalışmada makrofajlar ile PMPlerin arasındaki etkileşimi anlamayı amaçladık. Ayrıca PMPlerin temas ettikleri makrofajlardaki değişimleri anlamak istedik. Bu tez ile aktif insan trombositlerinden salınan mikrokeseciklerin THP1 monositik hücre hattından üretilmiş makrofajlar ile etkileşime girdiklerini gösterdik. Makrofajlar tarafından hücre içine alınan PMPler, geç endozoma yerleştiler. M2 makrofajına kutuplaştırılmış olan THP1 hücreleri daha gelişmiş fagositik aktivite göstererek daha fazla PMPyi hücre içine aldı. Ayrıca, yaptığımız fonksiyonel çalışmalar PMPlerin pro-inflamatuar M1 ve immunsupresif M2 makrofajlarına kutuplaşmasına veya herhangi bir immün yanıt oluşturmasına neden olmadığını ortaya çıkarmıştır. Bu nedenle, biz PMPleri taşıyıcı sistemler olarak kullanmaya karar verdik ve onları TLR (Toll-like receptor) agonistleri ile birlikte kullandık. TLR agonistlerinden ssRNA'ya bağlanan TLR7 ve CpG'ye sahip ss/dsRNA'ya bağlanan TLR9 agonistini PMP moleküllerinin içine yüklemek için laboratuvarımızda geliştirilen dehidrasyon-rehidrasyon yöntemini kullandık. Farklı sağlıklı donörlerden aldığımız periferik kan hücreleri ve monositleri üzerinde farklı TLR agonistlerini taradığımızda TLR9 agonisti D-tipi CpG oligonükleotit yüklü PMPlerin M1-benzeri ve TLR7-8 agonisti R848 yüklü PMPlerin M2-benzeri immün tepkisi gösterdikleri gözlendi. Sonuç olarak bulgularımız, makrofajların uygun ligand kombinasyonları ile yüklü PMPler ile muamele edilmesi durumunda M1-M2 makrofaj kutuplaşmasının düzenlenebileceğini göstermiştir. Böylece M1 makrofajları ile tümör gelişimini kontrol edebilir ya da M2 makrofajları ile oto-immün/oto-inflamatuar hastalıkların belirtilerini hafifletebiliriz.