Doku transglutaminaz ( varyant 2 ) ile transdüklenmiş mezenkimal kök hücrelerin kıkırdak doku mühendisliğinde kullanılması

Gelişmekte olan teknolojinin yan etkilerinden doğan obezite gibi hastalıklar yüzünden oluşan ciddi eklem kıkırdağı hasarları her geçen gün bireyler arasında artış göstermektedir. Kıkırdak dokusu, kan damarları ihtiva etmemesinden dolayı, kendi kendini yenileyememekte ve bu sebeple doku hasarlarının tedavisinde kıkırdak doku mühendisliğinin önemi gittikçe artmaktadır. Bu çalışmada, doku-transglutaminaz (varyant 2) ile transdüklenmiş sıçan kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücreleri (sKİMKH) kullanılarak kıkırdak doku yenilenmesi amaçlanmıştır. Bunun için hücreler doku-transglutaminaz-varyant 2 (TGM2_v2) geni ile transdüklendikten sonra, poli(bütilen süksinat) (PBSu) ve poli-L-laktit (PLLA) karışımı iskeleler üzerinde büyütülüp, farklılaştırılmıştır. Oluşan yapılar taramalı elektron mikroskobu ve MTS analizi ile sırasıyla topografik ve hücre canlılığı bakımından karakterize edilmiş ve ardından üç hafta boyunca kondrojenik farklılaşma testlerine tabi tutulmuşlardır. Kondrojenik matriks depolanmasını gözlemlemek için Alsiyan mavisi boyaması ve immünboyama; kıkırdağa özgü genlerin ifadesini incelemek içinse eş zamanlı-polimeraz zincir reaksiyonu yapılmıştır. Sonuç olarak, transdüklenmiş hücrelerin TGM2_v2'yi hem gen hem protein düzeyinde başarılı bir şekilde ifade ettikleri ve iskeleler üzerinde depolayabildikleri gözlenmiştir. Bu hücreler aynı zamanda kıkırdağa özgü proteinleri, herhangi bir kondrojenik indüksiyon olmadan kendiliğinden üretebilmişlerdir. Benzer bir şekilde, eş zamanlı-polimeraz zincir reaksiyonu sonucunda TGM2_v2 transdüksiyonunun hücrelere kendiliğinden kıkırdağa farklılaşma potansiyeli sağladığı görülmüştür. Özetle, TGM2_v2 ile transdüklenmiş sKİMKHler ve PBSu:PLLA ile oluşturulmuş olan bu yapı, gelecekte yapılacak olan kıkırdak doku mühendisliği çalışmalarında kullanmak üzere göz önünde bulundurulmalıdır.