Simultaneous determination of new generation antidiabetics in bio-fluids by HPLC

Bu çalışmada Sitagliptin, Saksagliptin, Vildagliptin ve Metforminin insan idrarında yanyana tayini için katılmış idrar örneklerinin tekrarlı ve doğrudan enjeksiyonuna imkan veren tam otomatik bir on-line SPE-LC-UV metodu ilk defa geliştirilmiştir. Tip 2 Diyabet dünyada en çok görülen hastalıklardan biridir. Bu hastalığın tedavisinde kullanılan gliptin grubu ilaçlar inkretin hormonunun yıkımının inhibe edilmesinde rol oynarlar. Tabletlerde ya tek başlarına ya da metformin ile kombine halde bulunurlar. Bu ilaçların idrarla atılım oranları yüksek olduğu için geliştirilen metot insan idrar örneklerine uygulanmıştır. Çalışmada kromatografik ayrılma için bir Gemini C18 kolon 10 mM o-fosforik asit-metanol mobil faz karışımının gradiyent elüsyonu ile ve idrar örneklerinin fraksiyonlanması için LiChrospher® ADS SPE-kolon kullanılmıştır. Katılmış idrar örneklerinin fraksiyonlanma, transfer, elüsyon ve ayrılması için geçen toplam analiz süresi sadece 9.6 dakikadır. Geliştirilen metot ICH kılavuzlarına göre valide edilmiştir. Kalibrasyon eğrileri, tatmin edici regresyon katsayıları ile beraber 10 ng/mL ile 100 μg/mL gibi geniş bir aralıkta doğrusaldır. İdrar atılımları gözönüne alındığında LOD ve LOQ değerleri tatmin edicidir. Doğruluk, gün içi ve günler arası tekrarlanabilirlik değerleri düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda Anova testi ile hesaplanmıştır. Geliştirilen metot klinik laboratuvarlarda pratikliği, kolayca bulunabilen detektörü ve güvenilir sonuçları bakımından uygulanabilirdir.