Exosome-mediated induction in tumorigenesis of ovarian tumor microenvironment cells

Jinekolojik hastalıklar arasında 3% oranı ile düşük insidanslı olmasına rağmen ovaryum kanseri, kadınlarda kansere bağlı ölümlerde yedinci sırada yer almaktadır. Erken dönemde diyagnozunun zor olması, hastalığın son evrelerinde teşhis edilebilmesi, ameliyat ve kemoterapi sonrası sağkalım oranının düşük olması sebebiyle ovaryum kanserinin karsinojenez mekanizmasının açıklanması oldukça önemlidir. Bu çalışmada kanser hücrelerinden salınan onkojenik sinyal taşıyan eksozomların, tümör mikroçevredeki hücreler tarafından alınmasıyla tümörigenezin uyarıldığını göstermek amaçlanmıştır. Cisplatin dirençli A2780 hücrelerinden salınan eksozomlar ultrafiltrasyon ve diferansiyel santrifüjleme yöntemi ile izole edildi. Primer yumurtalık kanseri (A2780), ovaryum yüzey epitelleri (OSE) ve mezotelyel (MeT-5A) hücreler hedef olarak kullanıldı. İzole edilen eksozomlar, immunoblot analizi ve nanopartikül boyut ölçümüyle karakterize edildi. PKH26 ile işaretlenen eksozomların hedef hücrelere alınması konfokal mikroskobuyla gözlenirken hücre içine alınım yolları inhibitörler kullanılarak akış sitometrisiyle belirlendi. Eksozom alınımıyla ROS üretiminin farklılaşması, migrasyon, invazyon ve proliferasyon hızları ile EMT üzerindeki etkileri incelenmiştir. Boyutu 30-150 nm arasında bulunan eksozomlar, eksozom proteinleri olan Alix ve Tsg101 içerirken ER belirteci olan calnexini içermemektedir. PKH26 ile işaretlenen eksozomlar hedef hücrelere farklı endosomal yolları kullanarak 6 saatte girmektedir. Eksozom alınımından sonra ROS üretimi, migrasyon ve invazyon hızları MeT-5A hücreleri hariç, A2780 ve OSE hücrelerinde artmıştır. EMT ve proliferasyon hızları da etkilenmiştir. Sonuç olarak, yumurtalık kanserinin primer ve sekonder tümör mikroçevresindeki hedef hücrelerin karsinojenez mekanizması, yumurtalık kanserindeki eksozomların alınmasıyla uyarılmıştır.