Yumuşak doku kanserleri üzerine immüno-sitosensör geliştirilmesi

YUMUŞAK DOKU KANSERLERİ ÜZERİNE İMMÜNO-SİTOSENSÖR GELİŞTİRİLMESİ Bu tez çalışmasında, öncelikle La0.25Fe0.75FeO3 nanoparçacığı sol-jel yöntemi kullanılarak sentezlenmiştir. Nanoparçacıklar (La0.25Fe0.75FeO3), yüklü poliakrilonitril nanolifler (PANnf), kalem grafit elektrot (PGE) yüzeyinde elektro-eğirme ile hazırlandı. Bir diğer aşamada ise karsinoembriyonik antijen (CEA) biyobelirteç reseptörü olarak CEA antikorları (Anti-CEA) ile yüklendi. Son olarak, CEA tespiti için PGE/PAN+La0.25Fe0.75FeO3/Anti-CEA kullanıldı. Üretim adımları, bir [Fe(CN)6]3−/4− probu varlığında döngüsel voltammetri ve elektrokim-yasal empedans spektroskopisi ile karakterize edildi. Optimizasyon aşamaları ve hücre çalışmaları differansiyel puls voltammetre (DPV) kullanılarak gerçekleştirildi. Bu kompozit sistemin kullanımı, CEA'nın etiketsiz tespiti için yeni bir immünosensör geliştirme yaklaşımıdır. Optimum koşullar altında, PGE/PAN+La0.25Fe0.75FeO3/Anti-CEA immüno-sensörün tayin sınırı LOD (3 s/m)= 1,48 ng/mL, alt tayin sınırı LOQ = (10 s/m ) = 4,94 ng/mL, tekrarlanabilirlik (RSD)=%1,46 (n=5) ve antijen konsantrasyonu için 0,1-10 ng/mL doğrusal çalışma aralığında R2 =0,9984 olarak bulunmuştur. Sonuçlar, sunulan sistemle CEA konsantrasyonundaki çok küçük değişikliklerin bile algılanabileceğini göstermiştir. Ayrıca dopamin ve askorbik asit içeren gerçek serum örneklerinde immünosensör geri kazanımı 98,94 ± 7,43 olarak bulunmuştur. Farklı kanser biyobelirteçlerinin klinik taramasında büyük potansiyele sahiptir. Sitosensör olarak, 48 saatlik inkübasyondan sonra RT-4, MDA-MB-231, T98G ve MCF-7 hücrelerinin PGE/PAN, PGE/PAN/La0.25Fe0.75FeO3 modifiye ve antikor/antijen kaplı (PGE/PAN/La0.25Fe0.75FeO3/Anti-CEA/BSA/CEA) yüzeylere olan teması ile oluşan akım düşüşünün kanserli hücrelerin yoğunluğu ile bağlantılı olduğu sonucuna ulaşıldı. Anahtar Kelimeler: İmmüno-sitosensör, Karsinoembriyonik antijen (CEA), Nanopartikül, Kalem Grafit Elektrot, PAN nanolif, Kanser hücresi