Niş benzeri kokültür sistemi ile akut myeloid lösemi kök hücrelerinin karakterizasyonu

AML heterojenitesinin lösemi hücrelerinin hiyerarşik organizasyonundan kaynaklandığı ve bu hiyerarşik yapının en üstünde yer alan LKH'lerin hastalık prognozu ile ilişkisi gösterilmiştir. Hem lökomogenezin hemde ilaç direnç mekanizmalarının anlaşılabilmesi için çok önemli olan LKH'lerin çalışılabileceği in vitro kültür sistemlerine ihtiyaç duyulmaktadır. Bu çalışmada, niş benzeri kokültür sistemi ile AML örneklerinde LKH' lerin, uzun dönem idamesi sağlanmıştır. Lösemik popülasyondaki LKH' lerin sıklığının belirlenmesi yanında, LKH' lerin kendini yenileyebilme ve lösemi oluşturabilme potansiyellerinin incelenmesi için proliferasyon hızlarına, blastik koloni ve lösemik kaldırım taşı oluşturma kapasitelerine ve ALDH aktivitelerine bakılmıştır. Kısa dönem kültürde, CFSE analizi ile proliferasyon indeksi hesaplanmıştır. LKH' lerin tespit edilmesi ve HKH ayırımında kullanılabilecek faklı belirteçlerin (VEGFR-2, CD25, TIM3 ve CLL-1) etkinlikleri değerlendirilmiştir. AML örneklerinde lösemik koloni ve kaldırım taşı alanlarının oluşumu gözlenirken, sağlıklı kemik iliği örneklerinde bu oluşumlar gözlenmemiştir. Kontrollerde düşük ALDH aktivitesi gösteren ana hücre popülasyonun aksine, AML örneklerinde orta ALDH aktivitesinin olduğu ve bu popülasyondaki LKH oranının kültür boyunca stabil kaldığı, remisyon örneklerinde ise bu oranın düştüğü saptanmıştır. Heterojenite nedeniyle proliferasyon indekslerinin geniş bir dağılım aralığı görülmüştür. Seçilen LKH yüzey belirteçlerinin tanı ve relaps örneklerinde remisyon örneklerine göre daha fazla ifade edildiği ve HKH ayırımında kullanılabileceği gösterilmiştir. Sonuç olarak, tanı anında yapılacak niş-benzeri kokültür ile ve ALDH aktivitesine bakılarak LKH sıklığı ve fonksiyonları hakkında bilgi edinilebilir. Hastalık prognozu hakkında erken dönemde elde edinilen bu bilgiler ile tedavi planlaması yapılabilir.