Merkezi yolla enjekte edilen nesfatin-1'in hipotalamusta siklooksijenaz ve lipoksijenaz enzimleri üzerine etkisinin western blot yöntemi ile araştırılması

Nesfatin-1 vücut sıcaklığının düzenlenmesi, enerji dengesi, kan şekerinin düzenlenmesi, üreme sistemi, gastrointestinal sistem ve stres üzerinde fizyolojik ve metabolik etkileri olan tokluk uyarıcı bir nöropeptiddir. Bununla beraber hem merkezi hem periferik yolla uygulanan Nesfatin-1'in kan basıncı, kalp atış hızı, plazma katekolamin ve vasopresin seviyelerini etkilediğine dair bulgular vardır. Oksitosin, melanokortin ve pro- opiomelanokortin reseptörlerin Nesfatin-1'in kardiyovasküler etkilerinde rol oynadığı bilinmektedir. Bu reseptörler dışında Nesfatin-1'in kardiyovasküler etkilerine aracılık eden diğer mekanizmalar konusunda çok sınırlı literatür bulunmaktadır. Nesfatin-1 ve araşidonik asidin kardiyovasküler etkileri arasında benzerik bulunmaktadır. Araşidonik asit siklooksijenaz ve lipoksijenaz enzimleri aracılığı ile prostaglandinlerin ve leukotrienlerin sentezinde prekursor rolu olan bir molekülken, bu enzimlerin inhibe edilmesi Nesfatin-1'in de anti-inflamatuar ve stress durumunda koruyucu etkilerini bastırdığını gösteren çalışmalar bulunmaktadır. Bu çalışmanın amacı merkezi yolla enjekte edilen Nesfatin-1'in kardiyovasküler etkilerinin araşidonik asit (AA) yolağı üzerinde bulunan siklooksijenaz (COX1 ve COX2) ve lipoksijenaz (LOX) enzimlerinin ifadesini ölçerek araştırmaktır. Çalışmada kontrol, salin ve nesfatin olmak üzere üç farklı gruba ayrılmış 21 erkek Sprague-Dawley sıçan kullanılmıştır. Kontrol grubundaki sıçanlara hiçbir farmakolojik işlem uygulanmadan hipotalamusları çıkarılırken, salin ve nesfatin gruplarına merkezi yolla salin veya Nesfatin-1 verildikten 20 dakika sonra hipotalamusları izole edilmiştir. Örneklerdeki siklooksijenaz ve lipoksijenaz enzimlerin miktarı Western Blot yöntemi ile araştırılmıştır. İkinci olarak her bir deney grubundaki (kontrol, salin ve nesfatin) örneklerin birleştirilmesi ile havuz örnekler oluşturulmuştur ve aynı şekilde Western Blot ile ifadelerindeki değişimine bakılmıştır. İlk çalışmada istatistiksel olarak anlamlı bir COX1, COX2 ve LOX artışı gözlenmezken havuz çalışmada bu enzimlerde hafif bir artış gözlenmiştir.