Oral alınan deterjanların kolon epitelyal bariyerine etkisinin e-cadherın, N- cadherın , alfa smooth muscle actin (α-SMA) ve transepithelial electrical resistance (TEER) ölçümleri ile belirlenmesi

Epitel doku ve oluşturduğu bariyer canlılığın devamı için çok önemlidir. Kolon epitel bariyeri hem mikrobiyal kontaminasyonunu önlemekte hem de besin ve su taşınımında çok önemli fizyolojik roller oynamaktadır. E-cadherin epitelyal; N-cadherin ve alfa-SMA mezenkimal belirteçler olup epitel bariyer disfonksiyonu bu belirteçler ile değerlendirilebilmektedir. TEER ölçümü de epitel bariyer fonksiyonunu belirlemede kullanılan en önemli metotlardan biridir. Çalışmamızın amacı farklı konsantrasyonlarda deterjan uygulanmış bağırsak epitel hücrelerinin bu belirteçler aracılığıyla epitel bariyer disfonksiyonunu değerlendirmek ve proktokolit patogenezinde deterjanların rolüne değinmektir. GEREÇ VE YÖNTEM İnsan kolon epitel hücrelerine(Caco2) 1/25.000 ve 1/50.000 oranlarında seyreltilmiş olan bulaşık deterjanı uygulandı. Sonrasında Western blot yöntemi ile 24 ve 72. saatte e-cadherin, n-cadherin ve alfa-SMA düzeyleri ölçüldü. Eş zamanlı olarak 24 ve 72. saatte TEER düzeyi ölçüldü. BULGULAR 1/25000 konsantrasyonda deterjan uygulanan hücrelerde 24. saatte yapılan ölçümlerde TEER değerinde anlamlı azalma; E-cadherin ve alfa-SMA değerinde anlamlı artış görüldü. N-cadherinin tekrarlayan 3 ölçümde aynı değerde çıkması nedenli istatistiksel analiz yapılamadı .Aynı konsantrasyonda 72. saat ölçümünde TEER değerinde anlamlı fark saptanmazken; E-cadherin değerinde anlamlı artış, n-cadherin ve alfa-SMA değerinde anlamlı azalma görüldü . 1/50000 konsantrasyonda deterjan uygulanan hücrelerde 24. saatte yapılan ölçümlerde TEER değerinde anlamlı artış ; E-cadherin ve n-cadherin değerinde artış , alfa-SMA değerinde anlamlı azalma görüldü . Aynı konsantrasyonda 72 saatte yapılan ölçümlerde TEER ve e-cadherin değerinde anlamlı fark saptanmazken; n cadherin ve alfa SMA değerinde anlamlı azalma saptandı . SONUÇ Deterjanın TEER değerini düşürdüğü ve doz bağımlı olduğu görülmüştür. Burdan yola çıkılarak epitel bariyerini bozucu etkisi anlaşılmıştır . EMT( Epitelyal-mezenkimal dönüşüm ) üzerindeki etkilerine EMT belirteçleri aracılığıyla bakıldığında doza ve ölçüm zamanına göre değişken sonuçlar görülmektedir . Doğru doz ve uygulama süresini belirlemek için daha ayrıntılı çalışmalara ihtiyaç duyulmaktadır .