Peptid ile zenginleştirilmiş kemik iliği stromal kök hücrelerinden elde edilen ekstraselüler veziküllerin karakterizasyonları

Günümüzde rejeneratif tıpta giderek önem kazanan ekstraselüler veziküller (EV) hücreler arası iletişimi düzenleyen nano boyutlu veziküller olarak tanımlanmaktadır. Neredeyse her hücre tipinden salınan ekstraselüler veziküller biyoterapötik, immünmodülatör, antiinflamatuvar ve rejeneratif özellikleriyle dikkat çekmektedirler. Bu tez çalışmasında, sıçan kemik iliği stromal kök hücrelerinden elde edilen ekstraselüler veziküllerin karakterizasyonu ve peptid ile zenginleştirilmesi incelenmiştir. Çalışmada sıçan kemik iliğinden önce kemik iliği stromal kök hücreleri (KİSKH), daha sonra da bu kök hücrelerden ekstraselüler veziküller elde edilip karakterizasyonları yapıldı. KİSKH'lerin yüzey belirteçleri akış sitometrisi yöntemiyle incelendi. 7., 14. ve 21. günlerde kondroblasta ve osteoblasta farklılaşma kapasiteleri incelendi. Karakterizasyonu tamamlanan KİSKH'ler kültüre edilerek süpernatantlarından EV'ler, ultrafiltrasyon tekniği ile izole edildi. EV'ler, Bisinkoninik Asit (BCA) protein tayini, Video Drop, Nanoparçacık izleme analizi (NTA) ve taramalı elektron mikroskobu yöntemleri ile karakterize edildi. Ardından EV'ler, BMP-2 peptidi ile zenginleştirildikten sonra protein içeriği ve morfolojik özellikleri incelendi. Sonuçlar, izole edilen KİSKH'lerin ve bu hücrelerden elde edilen EV'lerin analizlerle doğrulandığını ve osteogenez ve anjiyogenez gibi birçok biyolojik süreci etkileyebilecek moleküler içeriklere sahip olduğunu göstermektedir. Peptid zenginleştirmesi, EV'lerin farklılaştırmayı artırıcı yönde etkiler oluşturduğunu ortaya koymaktadır. Bu sonuçlar, KİSKH-EV'lerin gelecekteki uygulamalarda hücre dışı tedavi aracı olarak kullanılabileceğini işaret etmektedir.