PrPC anlatımları susturulmuş H69 ve H69AR hücre hatlarında hücre ölüm belirteçlerinin qRT-PCR yöntemiyle araştırılması

Hücresel Prion proteini (PrPC), embriyogenezin erken safhalarında ifade edilmeye başlanan bir hücre yüzey proteindir. Merkezi sinir sistemi hücreleri ve lenfoid dokularda en çok ifade edilen bu protein birçok rolde görev almasına rağmen birçok işlevi henüz tam olarak aydınlatılamamıştır. Diğer yandan, yapılan çalışmalar PrPC'nin kanser hücrelerinde de yüksek seviyede ifade edildiğini göstermekte, sağ kalım ve çoklu ilaca dirençlilik (MDR) mekanizmalarında rol aldığı öne sürülmektedir. PrPC, kanser hücrelerinde gösterdiği işlevler nedeniyle ilgi odağı olmuş ve programlı hücre ölümü ve çoklu ilaca direnç mekanizmalarındaki rolü nedeniyle yeni tedavi yaklaşımları için potansiyel bir hedef haline gelmiştir. Bu çalışmanın amacı, küçük hücreli akciğer kanseri (KHAK) hücre hatlarında (H69) ve bunun ilaca dirençli formunda (H69AR) PrPC ifadelenmesi ile programlanmış hücre ölümü arasındaki ilişkileri belirlemektir. Bu çalışmada, PrPC'nin programlanmış hücre ölümü ve çoklu ilaca direnç mekanizmaları üzerindeki rollerini belirlemek amacıyla her iki hücre hattından kontrol grubu, PrPC siRNA uygulanmış grup, Doksorubisin uygulanmış grup ve PrPC siRNA+Doksorubisin uygulanmış grup olmak üzere dört grup oluşturulmuş ve Prnp, Bax, Becn1, CD44 genlerinin ekspresyon düzeyleri qRT-PCR (kantitatif Gerçek Zamanlı Polimeraz Zincir Reaksiyonu) yöntemi ile araştırılmıştır. H69 hücre hattında PrP'nin siRNA ile baskılanması sonucunda CD44 ifadelenme düzeylerinde artış olduğu gözlenmiştir (p<0,05). H69AR hücre hattında ise PrPC baskılanması sonucu Becn1 ve CD44 ifadelenme düzeylerinde gözlenen artışın yanı sıra Doksorubisin uygulanmış grupta Prnp ifadelenmesi de önemli derecede artmıştır (p<0,05). Ancak, PrPC siRNA ve PrPC siRNA+Doksorubisin gruplarının Prnp düzeylerinde anlamlı bir değişim belirlenmemiştir (p>0,05). Elde ettiğimiz bulgular ile, Prnp ifadelenmesinin H69 hücre hattında CD44 ile ilişki halinde olduğunu ve H69AR hücre hattında otofaji ve ilaç dirençliliği ile önemli ölçüde yakından ilişkili olduğu sonucuna vardık. Sonuç olarak, MDR fenotipli küçük hücreli akciğer kanserlerinin tedavisinde, PrPC'nin baskılanması ile eş zamanlı uygulanan kemoterapinin etkin bir tedavi yöntemi olacağı kanısındayız.