Alkalin fosfatazının karboksimetilselüloz kimyasal modifikasyonu ile stabilizasyonu

Alkalen fosfataz, "fosforik monoester hidrolazlar" olarak adlandırılan bir grup enzim içinde yer alır, içinde hem Zn2+ ve hem de Mg2+bulunur ve bunlar kataliz ve stabilite için önemlidir. Karboksimetilselüloz (CMC) aslında karboksimetil selülozun sodyum tuzudur. Suda çözünebilen bir kimyasal reaksiyonla üretilen selülozdan türetilir. CMC'nin biyouyumluluk özelliğine sahip doğal bir organik polimer olması nedeniyle laboratuvarda ve birçok endüstriyel alanda yaygın olarak kullanılmaktadır. CMC l-etil-3- (3-dimetilaminopropil) karbodiimid (EDC) ile aktive edilmektedir. CMC alkalin fosfataz (ALP) ile birleştirilir ve CMC-ALP kovalent konjuge oluşturulur. CMC-ALP'nin stabilitesi, farklı pH değerleri (5, 6 ve 7) ve farklı sıcaklıklar (50, 60, 70 ve 80oC) altında çalışılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre, CMC-ALP'nin stabilitesi hem pH 5 ve 7'de hem de 50 ve 60oC sıcaklıkta artmıştır. Bununla birlikte enzimin aktivitesinin 70 ve 80oC den sonra azaldığı görülmüştür. CMC-ALP konjugasyonu, enzimin substrat aktivitesini ve katalitik performansını CMC'nin enzime kovalent ve çapraz bağlanmaları sayesinde arttırmıştır. Genel olarak, enzimlerin bir anyonik polisakkarit olan CMC ile modifikasyonu çeşitli denatüre edici koşullar altında enzimin stabilitesini arttırmak için yararlı bir yöntem olabilir.