TGF-beta1, TGF-beta2 ve FGF2 büyüme faktörlerinin mezenkimal kök hücrelerin kondrogenez sürecine etkisi

Amaç: TGFβ1, TGFβ2 ve FGF2 büyüme faktörleri mezenkimal kök hücrelerin in vitro kondrogenezi sürecinde oldukça etkilidirler. Bu çalışmanın amacı, TGFβ1, TGFβ2 ve FGF2 büyüme faktörlerinin belirli gün ve kombinasyonlarının Adipoz Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerin (AKMKH) kondrogenez sürecine olan etkisinin araştırılmasıdır. Yöntem: Tek tabaka kültür sisteminde AKMKH'ler; 3 gün boyunca I. grup-ITS, II. grup-ITS, III. grup-FGF2+TGFβ1 ve IV. grup- FGF2+TGFβ1 olacak şekilde kültüre edildiler. Bu 3 günün sonunda medyum değiştirilerek, 3 gün boyunca I. grup-ITS, II. grup-TGFβ2, III. grup-ITS ve IV. grup- TGFβ2 olacak şekilde tek tabaka kültür sistemine devam edildi. 3B pellet kültür sisteminde 3 gün boyunca I. grup-ITS, II. grup-ITS, III. grup-FGF2+TGFβ1, IV. grup- FGF2+TGFβ1, V. grup kondrojenik medyum ve VI. grup DMEM+FBS ile muamele edildi, üç günün sonunda medyum değiştirilerek bu kez I. grup-ITS, II. grup-TGFβ2, III. grup-ITS, IV. grup- TGFβ2, V. grup kondrojenik medyum ve VI. grup DMEM+FBS olacak şekilde uygulandı. 6. günün sonunda 3B pellet kültür gruplarına kondrojenik medyum eklenerek 21 gün boyunca kültüre edildiler. Tek tabaka kültür sistemleri ile oluşturduğumuz gruplarda kültürün 6. gününde alsiyan mavisi boyaması ve Dimethylmethylene Blue (DMMB) analizi gerçekleştirildi. 3B pellet kültür sistemleri ile oluşturduğumuz gruplarda alsiyan mavisi boyaması, DMMB analizi, ve immünohistokimya yöntemi ile COL2A1-ACAN ekspresyonları belirlendi. Bulgular: AKMKH kondrogenezi modelleri olan hem tek tabakalı kültür, hemde 3B pellet kültür sistemlerinde, TGFβ1, TGFβ2 ve FGF2'nin birlikte kullanımı kıkırdak matriksinin oluşumunda pozitif bir etki yaratmıştır. Sonuç: AKMKH kültür sistemlerine; TGFβ1, TGFβ2 ve FGF2'nin belirli süre ve kombinasyonlarının uygulanması in vitro kondrogenez modelini olumlu yönde desteklemektedir. Anahtar Kelimeler: AKMKH, TGFβ1, TGFβ2, FGF2, in vitro kondrogenez.