ADAMTS14 promotorunun klonlanması ve karakterizasyonu

ADAMTS genlerinin, tümörlerin ortaya çıkması, gelişmesi ve metastazında önemli bir rol oynadığı ortaya konmuştur. Bu gen ailesinin üyelerinden biri olan ADAMTS14 geni kollajen içerikli ADAMTS grubunu oluşturmaktadır. ADAMTS14, 2002 yılında insan kromozomu 10q22.1'de bulunan ve ECM'nin birleştirilmesi ve bozulmasında önemli bir rol oynayan bir proteinazı kodlayan bir gen olarak keşfedilmiştir. ADAMTS14'ün anormal ekspresyonunun, hücre proliferasyonu ve metastazı dahil olmak üzere tümör hücresi davranışlarını etkilediğine dair çalışmalar bulunmaktadır. Bu yüksek lisans tezi kapsamında ADAMTS14'ün farklı hücre hatlarındaki ekspresyon ifadesi incelenmiştir. Ayrıca ADAMTS14 geninin promotor bölgesinden oluşturulan 5' delesyon mutantlarının klonlanması ve doğrulanması gerçekleştirilmiştir. Doğrulanması için SW480 kolon kanser hücre hattında kalsiyum fosfat presipitasyonu ile geçici transfeksiyonu gerçekleştirilmiştir. ADAMTS14 gen ifadesi ile IL-6 arasındaki ilişkiyi incelemek için IL-6 sitokinin hücrelere farklı miktarlarda uygulanmış olup (20 ve 40ng), etkileri mRNA düzeyinde Real-Time PCR metoduyla belirlenmiştir. Bu sayede ADAMTS14 geni ve kolon kanseri üzerinde literatüre yeni bilgiler eklenmiştir.