Aflatoksin M1 tayinine yönelik elektrokimyasal immünosensör geliştirilmesi

Aflatoksin M1 (AFM1), küfler tarafından aflatoksin B1'in yemler aracılığı ile süt hayvanına geçmesi ve vücutta metabolize olması sonucu oluşan bir mikotoksindir. Bu nedenle süt ve süt ürünleri AFM1 içerebilir. Uluslararası Kanser Araştırma Enstitüsü (IARC) tarafından aflatoksin M1, Grup 1 karsinojen bileşik olarak bildirilmiştir. Bu nedenle AFM-1'in tayini önemlidir. Projenin amacı, aflatoksin M1'in hızlı ve kesin tayinine yönelik bir immunosensör geliştirmektir. Tasarlanan immunosensörde, AFM1'e spesifik bir antikor molekül, tek kullanımlık perde baskılı karbon elektrot yüzeyine kovalent olarak bağlanmasının ardından AFM1 ile muamele edilerek birleşmesi sağlanmıştır. Yüzeyde oluşan bu antikor/aflatoksin kompleksi elektrokimyasal impedans spektrometri tekniği (EIS) ile tayin edilmiştir. Tasarlanan immunosensörün seçiciliği anti– AFM1 ile etkileşime girmeyen bir toksin olan okratoksin A (OTA) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Böylece herhangi bir işaretlemeye gerek duyulmadan işaretsiz bir hızlı tanı sistemi geliştirilmiş olacaktır. Sensör yüzeylerine yabancı bir molekül veya yapının bağlanmaması için BSA ile blokaj çalışmaları yapılmış olup BSA ile kaplanan ve kaplanmayan yüzeylerin yanıtları değerlendirilmiştir. Bulgulara göre AFM1 /OTA etkileşimlerinin BSA kaplı yüzeylerde daha yüksek olduğu görülmüştür. Çalışmada tek kullanımlık perde baskılı elektrotlar ile en uygun antikor derişimi 0.2 ppm olarak belirlenmiştir. Elde edilen spektrometri verileri değerlendirildiğinde, toksin derişiminin artmasıyla yanıtlarında arttığı ancak en uygun ayırımın 0.1 ppm toksin derişimiyle elde edildiği gözlenmiştir. Elde edilen sonuçlara göre tayin sınırı (LOD) 0.3 ppb olarak hesaplanmıştır. Çalışmada altın nanopartikül (AuNP) ile modifiye edilmiş ve edilmemiş sensör yüzeylerde farklı süt numuneleriyle çalışmalar gerçekleştirilmiştir. Analizler verileri incelendiğinde AuNP modifiye yüzeyin yanıtının daha yüksek olduğu bulunmuş ve hassasiyetin oldukça arttığı gözlenmiştir. Bu sonuçlara göre tasarımı yapılan biyosensör sistemin, gıda güvenliğini tehdit eden diğer toksinlerin analizleri için temel olabileceği sonucuna varılmıştır.