Anoxybacillus ayderensis Ay9 β-glukozidaz g226e mutantınınkarakterizasyonu

Enzimler, metabolik yolakların biyolojik anahtarlarıdır. Bu metabolik yolaklarda görev alan enzimlerden biri olan β-glukozidaz doğada yaygın olarak bulunur ve tüm yaşayan organizmalarla ilişkilidir. Glukoz hidrolaz ailesinin önemli bir grubunu temsil eden β-glukozidaz çok sayıda doğal ve yapay substratları bulunur ve bu substratlara karşı özgünlüğü farklıdır. Bu nedenle, endüstriyel açıdan önemlidir. Bu çalışmada, Anoxybacillus ayderensis Ay9 suşundan önceden kolonlamış ve N222S mutasyonuna sahip β-glukozidaz enzimine ikinci bir mutasyon yapmak amacıyla 226. Rezidüsündeki glisin glütamik aside dönüştürüldü. Daha sonra mutasyonun enzim üzerindeki etkisinin anlaşılması için enzim karakterizasyonu substrat olarak p-nitrofenil β-d-glukopiranozid (pNPG) kullanılarak yapıldı. Enzimin optimum sıcaklığı 50°C ve optimum pH değeri 7olarak belirlendi. Enzimin Km, Vmax, kcat ve Km/kcat değerleri sırasıyla 0,35 mM, 16,61 U/mg, 14,98 s-1, 42,26 s-1mM-1 olarak belirlendi.