Functions of the activation induced cytidine deaminase (AİD) and toll-like receptors (TLR) on regulation of the central B cell tolerance checkpoint

Projenin amacı, santral B hücre toleransını düzenleyen faktörlerin incelenmesidir. Aktivasyonla indüklenen sitidin deaminaz (AID) enzimi germinal merkezde yüksek seviyede eksprese olur ve somatik hipermutasyon ve sınıf değiştirme rekombinasyonu reaksiyonlarında rol alır. Dr. Meffre ve ark. bir yaygın değişken immün yetmezlik hastasında 14. ekzonda yer alan CTNNBL1 genindeki yeni bir mutasyonu keşfettiler ve bu hastada somatik hipermutasyonun azaldığını gösterdiler. Proje kapsamında, Ramos WT ve Ramos CTNNBL1 466v/v hücre hatlarını, CTNNBL1 WT ve CTNNBL1 466 V lentivirüslerini kullanarak, bu mutasyonun etkileri incelenmiştir ve somatik hipermutasyon sıklığının 2-3 kat azaldığı gösterilmiştir. Cantaert ve ark. [1] ve Kuroaka ve ark. [2] AID ekspresyonunun insan B hücrelerinde germinal merkez dışında erken gelişim basamaklarında da var olduğunu ve bu molekülün santral B hücre toleransı için gerekli olduğunu göstermiştir. B hücre reseptörü ve toll-benzeri reseptörlerinin aktivasyonu transitional (geçiş halinde olan) B hücrelerinde AID ekspresyonunun indüklenmesi için gereklidir. Projede, TLR9 molekülünün otoreaktif B hücrelerinin eliminasyonu için gerekli olduğunu ancak TLR7 molekülünün bu süreçte rol almadığı gösterilmiştir. Ayrıca, defektif santral B hücre toleransına sahip sistemik skleroz hastalarından [3] izole edilen naïf B hücrelerinde TLR9 molekülünün fonksiyonel olmadığı gösterilmiştir. Skleroderma patogenezinde rol alan CXCL4 molekülünün TLR9 ligandlarının endozomal lokalizasyonunu engelleyerek TLR9 fonksiyonunu ve AID indüksiyonunu inhibe ettiği gösterilmiştir. Sonuç olarak, CXCL4, skleroderma hastalarındaki defektif santral B hücre toleransından sorumludur.