Balık eti tazeliğinin tespiti için ksantin oksidaz enziminin polipipol-polivinilsülfonat filme immobilizasyonu ile amperometrik biyosensör hazırlanması

Bu çalışmada, ksantin ve hipoksantin tayini için yeni bir amperometrik biyosensör geliştirildi. Ksantin oksidaz, pirol ve polivinilsülfonat ile birlikte platin elektrot yüzeyine immobilize edildi. Ksantin ve hipoksantin tayini, enzim yüzeyindeki enzimatik reaksiyon sonucu oluşan ürik asidin +0,30 V' da yükseltgenmesine dayanılarak yapıldı. Ksantin ve hipoksantin biyosensörünün cevabına pH' nın, sıcaklığın ve substrat derişiminin etkisi incelendi. Enzim elektrodun hipoksantin için doğrusal çalışma aralığı 1,0x10-7 ? 1,0x10-3 M, tayin sınırı 1,0×10-7 M olarak tespit edildi. İmmobilize edilen ksantin oksidazın KM gözlenen ve VMAX gözlenen değerleri sırasıyla 0,0154 mM ve 1,203 µA/dakika olarak bulundu. Enzim elektrodun en iyi çalışma pH' sı 7,75 ve sıcaklığı 25 °C olarak belirlendi. 30 gün sonundaki amperometrik cevabının başlangıç değerinin % 49' u olduğu görüldü. Balık numunelerinde, balık eti tazeliğini yitirdikçe hipoksantin miktarının arttığı gösterildi.