Pirina yağından enzimatik yolla 2-monoasilgliserol üretimi

Bu çalışmada, 2-monoasilgliserol (2-MAG) üretmek için pirina yağının alkoliz reaksiyonu Candida antarctica kaynaklı ve ticari olarak Novozyme 435 olarak adlandırılan immobilize lipaz kullanılarak gerçekleştirildi. Yanıt yüzey yöntemi, alkoliz reaksiyonunda çeşitli değişkenlerin etkisini değerlendirmek ve reaksiyon koşullarını optimize etmek için dört faktörlü beş seviyeli merkezi birleşik dairesel tasarım kullanılarak uygulanmıştır. Dört ana faktör olarak; reaksiyon sıcaklığı (35–60 oC), zaman (4–10 saat), enzim miktarı (kütlece %10–18) ve substrat mol oranı (etanol:yağ, 40:1–90:1) seçildi. En uygun modeller üretilen 2-monoasilgliseroller için geri elimineli çoklu regrasyon ile başarıyla uygulandı. 2-monoasilgliserollerin üretimi için optimum reaksiyon koşulları; reaksiyon sıcaklığı 35 oC, reaksiyon zamanı 6 saat, substrat mol oranı 65:1 ve enzim miktarı %15 olarak bulundu. Bu optimum koşullar altında 2-MAG verimi % 87.8 olarak tahmin edildi. Optimum reaksiyonun model tarafından belirlenen verimi (% 87.8) deneyler sonucu elde edilen gerçek değerine yakın olarak bulundu (83.5 %). Alkoliz reaksiyon karışımından 2-monoasilgliserollerin geri kazanımı ve saflaştırılması iki metot kullanılarak yapıldı: çözücü ekstraksiyonu ve düşük sıcaklık kristalizasyonu. Çözücü ekstraksiyonu sonrası % 97 saflıkta ve % 87.7 geri kazanım verimiyle 2-MAG elde edildi. Düşük sıcaklık kristalizasyonu sonrası ise bu değerler sırasıyla % 93.7 ve % 69.2 olarak bulundu.