Enhancing direct conversion of mouse fibroblasts to induced hepatocytes

Transdiferansiyasyon farklılaşmış bir hücrenin, başka bir hücre tipine ait transkripsiyon faktörlerinin ifadesi ile başka bir hücreye dönüşmesi olarak tanımlanır. İndüklenmiş pluripotent kök hücrelerin farklılaştırılmasına göre bu sürecin daha hızlı ve potansiyel olarak daha güvenli olduğu düşünülmektedir. Ancak birçok açıdan bu dönüşümün verimi düşük kalmaktadır. Bu da soy dönüşümünün henüz tam olarak karakterize edilememiş engelleri olduğunu düşündürmektedir. Biz bu çalışmada bu engellerden birinin kromatinin yeniden modellemesi olabileceği hipotezini kurduk. Bu hipotezi test etmek için fare fibroblastlarının indüklenmiş hepatositlere dönüşümünü ele aldık. Fare fibroblastlarının indüklenmiş hepatositlere dönüştürülmesi için gerekli olan Hnf4α ve Foxa1 transkripsiyon faktörlerini fibroblastlarda ifade ettik ve hücreleri kromatin modifikatörlerinin küçük molekül inhibitörlerine maruz bıraktık. Sonrasında oluşan indüklenmiş hepatositlerin oluşma verimliliğini ve kalitesini gen ifadesi seviyesinde test ettik. Çalışmalarımız sonucunda H3K79 metiltransferaz DOT1L'in ve H3K27 metiltransferaz EZH2'nin inhibisyonunun indüklenmiş hepatosit oluşumunu desteklediğini gözlemledik. Bu iki modifikasyonun inhibisyonu indüklenmiş hepatositlerin normal fare hepatositlerine daha çok benzediğini bulduk. Ayrıca, hücrelerin transkripsiyon faktörlerinin ifadesinden önce yerine sonra küçük moleküllere maruz kalmasının daha etkili olduğunu gözlemledik. Ancak denediğimiz hiçbir küçük molekül bu iki transkripsiyon faktörünün yerine tamamen geçemedi. Bu çalışma ile fibroblasttan programlanmış fare hepatositlerinin kimliklerinin oluşturulmasında önemli olan kromatin modifikasyonlarını inceledik.