Glisin ile granüloza hücrelerinde nigerisin-aracılı piroptoz sonrası litik hücre ölümüne karşı hücre canlılığının korunması

Pro-inflamatuar bir hücre ölüm mekanizması olan piroptoz, gasdermin-aracılı hücre zarı por oluşumu, hücre şişmesi ve nihai litik hücre zarı parçalanması ile karakterizedir. PKOS (polikistik over sendromu)'ta granüloza hücrelerinin artan piroptotik ölümleri gözlemlenir. Granüloza hücreleri, oosit gelişimi ve hormon üretimi için kritik öneme sahip hücrelerdir. Bir aminoasit olan glisin'in, önceki piroptotik basamakları engellemeden, bir hücre zarı-yırtıcı protein olan NINJ1'ın oligomerizasyonunu engelleyerek hücre zarı yırtılmasını baskıladığı ve litik hücre ölümüne karşı koruyucu olduğu (sitoprotektif olduğu) önceki çalışmalarda başka hücre tiplerinde gösterilmiştir. PKOS'lu kadınların kan serumlarında glisin seviyelerinin düşük olduğu da önceki çalışmalarda belirlenmiştir. Bu glisin seviyesi düşüklüğü durumu, çeşitli hücrelerde, NINJ1-aracılı hücre zarı yırtılmasına karşı sensitiviteyi arttırabilir. Bu bağlamda, glisin eksikliği, granüloza hücrelerinin litik hücre ölümüne karşı duyarlı hale gelmelerine sebep olabilir. Glisin seviyelerinin arttırılarak (örn. foliküler sıvıda) granüloza hücrelerinin litik ölümünün baskılanması, PKOS'ta yeni bir terapötik strateji oluşturabilir. NINJ1 oligomerizasyonunu inhibe ederek glisin, granüloza hücrelerini aşırı litik hücre ölümünden koruyabilirken, piroptoz sinyalinin devam etmesine izin vererek (örn. gasdermin porlarını engellemeyerek) potansiyel olarak foliküler bütünlüğe ve yumurtalık fonksiyonuna olumlu etki yapabilir. Bu çalışmada, KGN insan granüloza hücre hattı kullanılarak nigerisin ile piroptoz'un tetiklendiği hücrelerde, glisin'in sitoprotektif potansiyeli ve inflamatuar yanıt üzerindeki etkileri, hücrelerden salınan PGE2 miktarları analiz edilerek değerlendirilmiştir. Elde edilen bulgular, tek başına belirgin bir değişim oluşturmayan glisin ve nigerisin uygulamalarının birlikte kullanıldığında, PGE₂ salınımının anlamlı düzeyde artırdığı göstermiştir. Ayrıca SDS-PAGE ve Commassie boyaması analizleri ile granüloza hücrelerinden total protein salınımı tüm deneysel durumlar arasında karşılaştırmalı olarak analiz edilmiştir. Glisin ile NINJ1-aracılı hücre zarı parçalanmasının baskılandığı granüloza hücrelerinde, piroptoz'un tetiklenmesi sonrası PGE2 salınımının artması, litik hücre ölümünün engellendiği hücrelerde gasdermin porlarının sayısındaki olası artışa hipotetik olarak bağlanmıştır. Bu çalışma ile, granüloza hücrelerinde litik hücre ölümünün ve glisin'in buradaki rolünün daha iyi anlaşılması için ön veriler sunulmuştur. Anahtar Kelimeler: Glisin, Nigerisin, NINJ1, PKOS, Granüloza Hücresi