Monoklonal antikorlarda şeker zinciri yapı tayini

Bu tezin amacı, göğüs kanseri tedavisinde kullanılan Trastuzumab monoklonal antikorunun glikan analizi için örnek hazırlama ve analiz metodunu geliştirmektir. Monoklonal antikorlarda glikan yapı, ilgili monoklonal antikorun fonksiyonel ve biyolojik aktivitesini belirlemektedir. Bunlar bağışıklık sistemi hücreleri tarafından antijenlerin tanımlanması, sinyal faaliyetlerinin düzenlenmesi ve üretilen terapötiklerin fizikokimyasal özellikleridir. Bu nedenlerden dolayı glikan yapının hızlı ve doğru izlenmesi terapötik ilaç üretimi, biyobenzer ilaç üretimi ve kalite kontrol süreçleri için çok önemlidir. Trastuzumab bünyesindeki glikan yapı, örnek hazırlama aşamasında birtakım enzimatik reaksiyonlar ve katı faz ekstraksiyon yöntemi kullanılarak MALDI-QIT-TOF-MS sistemi ile tayin edilmiştir. Özel bir software programı ile elde edilen glikan yapıların nitel analizi gerçekleştirilmiştir. MALDI-QIT-TOF-MS sistemi ile Trastuzumab yapısındaki G0-GlcNAc, G0F-GlcNAc, G0, G0F, G1F olarak adlandırılan (CFG adlandırmasına göre) N-glikanlar kütle/yük oranlarına göre tayin edilerek hızlı ve verimliliği yüksek bir yöntem elde edilmiştir. Anahtar sözcükler: Monoklonal antikor, MALDI-TOF-MS, N-glikan, trastuzumab.