(-)-gossypol (AT-101) ve rekombinant insan apo2l/trail'in tekli ve kombine dozlarının meme kanseri hücre hatlarında (MCF-7 ve MDA-MB-231) sitotoksik ve apoptotik etkilerinin araştırılması

AT-101, (-)- gossypolün enantiomeri olup, potent antikanser ajandır. Tümör nekrozis faktör ilişkili apoptozisi uyaran ligant (Apo2L/TRAIL) apoptozisi, tercihen kanser hücrelerinde uyarır. Amaç, AT-101 ile Apo2L/TRAIL'in tekli ve kombine dozlarının sitotoksik ve apoptotik etkilerinin insan meme kanseri hücre hatlarında (MCF-7 ve MDA-MB-231) araştırılması ve hangi apoptotik moleküllerin etkilendiğinin ortaya konmasıydı. Hücreler, 72 saat süresince, AT-101 (0.5-10?M) ve TRAIL (10-200ng/mL) ile inkübe edildi. XTT tabanlı canlılık testi kullanılarak sitotoksisite yüzdeleri hesaplandı. Apoptozis, histon-DNA fragmentasyonu ölçülerek kanıtlandı.MCF-7 ve MDA-MB-231 hücrelerinde IC50 değerleri sırasıyla, 4.64 ?M, 3.99 ?M (AT-101) ve 133 ng/mL, 93.2 ng/mL (TRAIL) idi. Sitotoksisite değerleri MCF-7 ve MDA-MB-231 hücrelerinde sırasıyla % 32.3, % 36.6 AT-101(2.5 µM) ve % 36.8, % 35.7 TRAIL (60 ng/mL) `di.60ng/mL TRAIL+ 2.5 ?M AT-101 kombinasyonunda MCF-7 hücrelerinde sinerjistik sitotoksisite % 78.2 (KI: 0.298) iken, MDA-MB-231 hücrelerinde % 83.2 (KI: 0.256)'di. 2.5 ?M AT-101 ile 80ng/mLTRAIL'in ardışık muamelesinde, sitotoksisite değerleri MCF-7 ve MDA-MB-231 hücrelerinde sırasıyla % 80.8 ve % 86.8'di.AT-101 ve TRAIL'in kombinasyonu, MDA-MB-231 hücrelerinde, Bax, Trail-R1, Kaspaz-3, Sitokrom C proteinlerinde artışa neden olurken, Pon2, Procaspase-3, Bcl-x, Bcl-2 ve Xiap proteinlerinde azalışa neden oldu. MCF-7 hücrelerinde, Bad, Trail-R1, Pon2, Fadd, Smac/Diablo, Sitokrom C proteinlerinde anlamlı artış, Ciap proteininde anlamlı azalış oldu.AT-101 ve TRAIL kombinasyonunun, MCF-7 ve MDA-MB-231 hücre kültürlerindeki sinerjistik apoptotik etkileri, ilk defa bu çalışmayla belirlendi.