Hepatoselüler karsinomada IP3 kinaz sinyal yolağının önemi

Hepatosellüler karsinoma (HCC) dünyadaki en yaygın oalrak gözlenen beşinci kanser türüdür ve tam olarak tedavisi mümkün değildir. Fosfo İnositol 3-Kinaz sinyal (PI3K) yolağı, hücre sağ kalımını ve proliferasyonunu, dolayısıyla tümör gelişiminde rol oynayan sinyal yolaklarını yönlendirmektedir. HCC'de dahil olmak üzere çeşitli kanser tiplerinde, bu yolağın ara mesajcısı olan Akt proteininin aşırı aktif hale geldiği bilinmektedir. HCC hücre dizilerinde PI3K/Akt sinyal yolağı aktivasyon durumu ve bu yolağın baskılanmasının moleküler ve hücresel etki mekanizmaları tam olarak belirlenememiştir. Çalışmamızda HCC hücre hatlarında PI3K/Akt sinyal yolağın aktivasyon durumunu ve bu yolağın baskılanmasının hücre davranışlarına etkisinin incelenmesi amaçlanmıştır. Bunun için dokuz HCC hücre dizisinde bazal koşullarda ve uyarılma sonrasında PI3K/Akt yolağının aktivasyon durumu ve yolağın PI3K'e özgül LY294002 inhibitörü ile baskılanması sonrasında ortaya çıkan hücresel davranış değişikliklerini incelenmiştir. Yolağın aktivasyon durumunu belirlemek için Western blotlama ve immünoboyama yöntemleri ile Akt ve aktive olmuş fosforile Akt protein düzeyleri incelenmiştir. Akt düzeyi ve/veya aktivasyonunun HCC hücrelerinde davranış değişikliklerine neden olup olmadığı değerlendirilmiş; bunun için, MTT ve BrdU inkooperasyon yöntemleri ile hücre proliferasyonu, LDH testi ile hücre ölümü, FACS analizi ile hücre döngüsü ve hücrelerin yara kapatma etkinlikleri ile hücre motilitesi belirlenmiştir. PI3K/Akt yolağının HCC hücre dizilerindeki aktivasyon düzeyinin farklı olduğu az diferansiye hücrelerde Akt aktivasyon düzeyinin diğer hücrelere göre daha yüksek seviyede olduğu saptanmıştır. Aynı zamanda bu hücrelerde PI3K/Akt yolağının çeşitli büyüme faktörleriyle uyarılabileceği belirlenmiştir. Bunlara ek olarak PI3K/Akt yolağının baskılanmasıyla hücre proliferasyonunun azaldığı, bu azalmanın hücre döngüsünde G1 safhasındaki birikmelerden kaynaklandığı gözlemlenmiştir. Akt yolağı aktivasyonu ile hücre motilitesinin arttığı bu yolağın inhibisyonunun hücrelerin hareketliliğini azalttığı gösterilmiştir. Verilerimize göre PI3K/Akt yolağı baskılanması hücrelerin proliferasyonu ve hareketliliğini dolayısıyla tümörojenik gelişimi ve ilerleyişini azaltmaktadır. Elde edilen sonuçlar PI3K/Akt yolağının önemli olduğunu ve HCC tedavisinde önemli bir hedef olabileceğini düşündürmektedir.