Periton karsinomatozunda kras mutasyonunun rolünün araştırılması

Periton karsinomozu, tümörün birincil konumundan kopmasıyla başlayan ve daha sonra periton yüzeyine tutunup, submezotelyal tabakaya sızmasıyla ikincil lokasyonunu oluşturana kadar olan süreci kapsamaktadır. Pankreatik duktal adenokarsinom (PDAK) ve kolorektal karsinom (KRK) başta olmak üzere gastrointestinal kanserler periton metastazına yatkınlık göstermektedirler. Söz konusu projenin hipotezi klinik bir vaka üzerinden şekillendirilmiştir. Bu vakada hepatoselüler karsinomlu (HSK) bir hastada tümör büyümesinden kaynaklı rüptür tespit edilmiştir. Ameliyat esnasında karın boşluğuna dökülmüş canlı tümör parçalarına rastlanmış̧, ancak hastada ne ameliyat esnasında ne de üç yıllık ameliyat sonrası takibinde peritonal yayılım gözlenmemiştir. Bu klinik durumdan yola çıkıp ve PDAK ve KRK'nin peritona metastaza yatkınlığı da göze önünde bulundurarak, çalışmamızda KRAS mutasyonunun periton karsinomatozundaki rolünün araştırmasına karar verilmiştir. KRAS mutasyonu PDAK ve KRK'de sıklıkla görülen bir mutasyon olup, HSK hücreleri KRAS wild- type'tır. Bundan dolayı HSK hücre hatlarına KRAS mutasyonu viral transdüksiyon yoluyla entegre edildikten sonra HSK hücrelerindeki moleküler değişiklikler incelenmiş, daha sonra bu hücreler insan hepatik stellate hücreleriyle birlikte ko-kültür edilerek oluşan fibrozis formunda ön metastatik niş oluşumları araştırılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre HSK hücrelerinin ek mutasyona ihtiyaçları olmaksızın çoğalabildikleri, göç edebildikleri ve yumuşak agarozda koloni oluşturabildikleri gözlemlenmiş olup, bu veri hipotezin oluşmasında temel alınan klinik vakayı desteklemektedir. İkinci aşamada moleküler değişikliklerin incelenmesi amacıyla periton metastazında ve fibroziste ön plana çıkan genlerin bulunduğu bir panel oluşturulmuştur. Oluşturulan panel, ko-kültür yapılan hücrelere uygulandığında, her ne kadar KRAS mutasyonunun direkt olarak etkilediği anlamlı bir hedefe rastlanmadıysa da farklı ko-kültür ortamlarında mutasyondan bağımsız olarak kanser hücrelerinde değişiklik gösteren gen ifadelerine rastlanmıştır. Bulunan farklılıklar tümör- stroma arasındaki ilişkinin aydınlanmasında yardımcı olurken, aynı zamanda bu tümörlerin ön metastatik niş oluşturması ile ilgili yapacağımız araştırmaların da temelini oluşturacağı düşünülmektedir.