B. spergulifolius ekstraktlarının insüline dayanıklı 3T3-L1 adipositler üzerindeki etkisinin araştırılması

Diabetes mellitus (DM), yetersiz insülin sekresyonu ve / veya insülin etkisi kusuru nedeniyle metabolik sonuçlar, kronik hiperglisemi ile karakterize metabolik bir hastalıktır. DM sıklıkla kardiyovasküler hastalıklara, göz, böbrek ve sinir sisteminde çeşitli komplikasyonlara neden olur. Tip 2 DM (T2DM), toplam DM'nin yaklaşık % 90'ını oluşturur. Bu nedenle, T2DM için yeni terapötik yaklaşımların ve potansiyel sinyal yolaklarındaki molekülleri hedefleyen alternatif, doğal ajanların araştırılması çok önemlidir. Tıbbi bitkiler, alternatif yeni ilaç etken maddelerinin araştırılmasında çok önemli kaynaklardır. Bolanthus spergulifolius (B. spergulifolius), Caryophyllaceae ailesinin cinslerinden biridir. Bu çalışmada B. spergulifolius ekstraktlarının 3T3-L1 adipositler üzerindeki potansiyel anti-diyabetik etkilerinin in-vitro olarak araştırılması amaçlanmıştır. B. spergulifolius, metanol (MeOH), etilasetat (EA) ve su ile ekstrakte edildi ve toplam fenolik içerikleri (TPC) Folin-Ciocalteu yöntemi ile değerlendirildi. Yüksek TPC (sulu< MeOH< EA) gösteren B.spergulifolius ekstraktlarının olgun 3T3-L1 adipositlerideki sitotoksik etkisi MTT asay ile değerlendirildi ve hücre canlılığında %50 azalmaya neden olan ekstrakt konsantrasyonları (IC50) belirlendi. MeOH, EA ve Sulu ekstraktlarının IC50 konsantrasyonları sırasıyla 305.7 ± 5.583 µg/mL, 567.4 ± 3.008 µg/mL ve 418.3 ± 4.390 µg/mL olarak gözlendi ve ileri deneylerde kullanılmak üzere seçildi için. Ölü/canlı hücre asay ile MeOH, EA ve Sulu ekstrelerinin sitotoksik etkisi doğrulanmıştır (sıırasıyla, %69.75 ± 1.70, %61.75 ± 1.70, %70 ± 4.24 ve hepsi için P< 0.05). Ayrıca, ekstrelerin olgun 3T3-L1 adipositlerinde lipid birikimi üzerindeki etkileri Oil-Red-O boyama testi ile değerlendirildi. Tedavi edilmemiş olgun adipositlere kıyasla ekstraktlar ile tedavi edilmiş olgun adipositlerde lipid birikimi etkili bir şekilde azalmıştır (tümü için P< 0.05). Ayrıca ekstraktların Bax ve Bcl-2 tarafından düzenlenen apoptoz üzerindeki etkisi qRT-PCR ile araştırılmıştır. Tedavi edilmemiş adipositlere kıyasla ekstraktlar, pro-apoptotik Bax ekspresyonunu artırarak, anti-apoptotik Bcl-2 gen ekspresyonunu azaltarak apoptozu önemli ölçüde indükledi (hepsi için P< 0.05). İnsülin direnci ile bağlantılı Glut-4 ekspresyonu, qRT-PCR, Western-blot ve Immunofluorescence boyama ile değerlendirildi. Buna paralel olarak, tedavi edilmemiş olgun adipositlere kıyasla ekstraktlarla tedavi edilen adipositlerde Glut-4 ekspresyonu, önemli ölçüde daha yüksekti (hepsi için P< 0.05). Ekstraktlar, çizik yara asay uygulamasından 30 saat sonra hücre göçünü önemli ölçüde baskıladı (hepsi için P< 0.05). Hücre morfolojisi ve hücre-çapı faz-kontrast mikroskobu, taramalı elektron mikroskobu (SEM), İmmünofloresans (anti-F-aktin ile) ve Giemsa boyaması ile değerlendirildi. Ekstraktlarla tedavi edilen adipositler kısmen küresel morfolojiyi kaybetti ve tedavi edilmemiş adipositlere kıyasla daha küçük hücre çapı gösterdi (hepsi için P< 0.05). Sonuç olarak, çalışmamız B. spergulifolius ekstraktlarının apoptozu indüklediğini, lipid birikimini azalttığını, yarayı iyileşmesini geciktirdiğini, Glut-4 seviyesini arttırdığını ve bu yolla DM'de insülin direncinin azalmasına katkıda bulunabileceğini göstermektedir. Anahtar Kelimeler: Bolanthus spergulifolius, diyabet, insulin dinci, 3T3-L1 adipositler, glikoz taşıyıcı tip 4, anti-diyabetik