Kanser tedavisinde kullanılan l-asparajinazın manyetik nanopartiküllere immobilizasyonu

Bu tezde, anti-lösemik enzim E. coli kaynaklı L-asparajinaz (EC 3.5.1.1) manyetik poli(HEMA-GMA) nanopartiküllerine immobilize edilmiştir. Karakterizasyon çalışmaları ile manyetik nanopartiküllerin ortalama boyutunun 117.5 nm olduğu ve asparajinazın sentezlenen manyetik nanopartiküllere kovalent olarak bağlandığı bulunmuştur. İmmobilize edilen asparajinaz enzimi miktarı 66.43 mg/g olarak hesaplanmıştır. İmmobilize asparajinazın aktivitesine pH, sıcaklık ve substrat derişiminin etkisi incelenmiştir. Serbest asparajinazın optimum pH'ı 7.5 bulunurken, immobilize asparajinazın pH'ı 6.5 olarak bulunmuştur. İmmobilize asparajinazın optimum sıcaklığı serbest asparajinaza göre 10°C artmış ve 55°C olarak gözlenmiştir. Serbest asparajinazın kcat değeri (47356 dak-1), immobilize asparajinazınkinden (497 dk-1) daha yüksek bulunmuştur. Ayrıca serbest ve immobilize asparajinazın ısıl ve depo kararlılıkları incelenmiş ve immobilize asparajinazın işlemsel kararlılığı belirlenmiştir. Bu tezde immobilize asparajinazın yapay insan serumundaki etkinliğini belirlemek üzere serbest ve immobilize enzimin aktivitesi ölçülmüş ve immobilize asparajinazın serbest asparajinaza göre %74.74 aktivite gösterdiği gözlenmiştir. Elde edilen sonuçlar hazırlanan asparajinaz immobilizasyon işleminin başarılı olduğunu göstermektedir.