KL21 kodlu poliherbal formülasyonun antikanser etkilerinin in vitro ve in vivo yöntemlerle belirlenmesi ve toksisite potansiyeli

Tümör hücrelerinde anjiyogenezin inhibisyon ve apoptozun indüksiyonu kanser tedavisinin en yeni stratejilerinden biridir. Bu nedenle proapoptotik aktiviteye sahip anjiyogenik inhibitörlerin keşfi, kanser tedavisinde dikkate değer bir öneme sahip olmaktadır. Bu amaçla tez çalışması, bir poliherbal formülasyon olan KL21'in anti kanser ajanı olabilecek bir farmasötik ürüne dönüşebilmesi için yapılması gereken araştırmaları ve uygulanması gereken yöntemleri ortaya koymak amacıyla dizayn edilmiştir. Çalışma kapsamında öncelikle formülasyonun etanol ve metanol ekstrelerinin total fenolik, flavonoid içeriği ile antioksidan kapasitesi kromotografik ve spektrofotometrik yöntemlerle belirlenmiştir. Ekstrelerin biyolojik aktivitelerinin belirlenmesi kapsamında, DPPH radikali süpürme kapasitesi ile ABTS renksizleştirme yöntemleri kullanılarak antioksidan kapasite tespit edilmiştir. Ayrıca MIC metodu ile metanol ekstresinin antimikrobiyal aktivite gösterdiği tespit edilmiştir. Toksisite testleri kapsamında hücre kültürü çalışmaları gerçekleştirilmiş, MCF-7, HEK-293 ve HeLa hücre hatlarında LD50 değeri tespit edilmiştir. Ekstrelerin AMES testi ile gentotoksik etki görmediği belirlenmiştir. Akut toksisite testi ile "LD50 değeri ≥ 2000 mg/kg" şeklinde sonuç elde edilmiş olup 28 gün süren subakut toksisite çalışmasına geçilmiştir. Bu çalışmanın sonunda, hematolojik ve biyokimyasal veriler sağlanmış, histopatolojik incelemeler gerçekleştirilmiştir. Formülasyonun anti-kanser özelliği belirlemek amacı ile Ehrlich tümör modeli ile farelerde solid tümör oluşturulmuş, KL21 pos-implantasyon grubunda tümör hacminde azalma tespit edilmiştir. Ayrıca "Real Time Ready Human Apoptosis Panel" ile apoptoz mekanizmasıyla ilişkili yaklaşık 84 genin ekspresyon profilleri incelenmiştir. Çalışmaların devamında formülasyonun HET-CAM metodu ile 900 mg/kg ve 600 mg/kg doz gruplarında anti-anjiyogenik potansiyeli ortaya konulmuştur. "Cyto Select Kit" ile hücre migrasyon denemesi gerçekleştirilmiş, yara kapanma yüzdesi % 28 olarak hesaplanmıştır.