Kanser terapisi için KLK gen düzenlenmesini crispr teknolojisi kullanılarak prostat kanseri hücre hatlarinda yapılması

Erkeklerde, kansere bağlı ölümlerde prostat kanseri ikinci sırada yer almaktadır. Genetik mutasyon, etnik köken, yaş, diyet vb. gibi iç ve dış faktörlerin, kanserin ortaya çıkmasında ki nedensel faktörlerden olduğu gözlemlenmiştir. Kallikrein (KLK) gen ailesi tarafından kodlanan serin proteazlar PC kanseri üzerinde dikkate değer etkiler gösterirler ve KLK3,KLK2 gibi bazı çeşitleri PC varlığında androjene bağlı kanda tespit edildiği için biyo marker olarak tanınmaktadır. Bununla birlikte, androjen bağımlılığı ve düşük özgüllük nedeniyle, tam olarak güvenilir değillerdir. Bu çalışmada, mutasyonun PC de tümör oluşumuna etkisini gözlemlemek için androjenden bağımsız PC3 ve DU145 PC hücre hatlarında KLK5 gen mutasyonuna odaklandık. Gen düzenleme teknolojisi, uzun vadede bilim adamlarının en az yan etki ile kanser tedavisi araştırmalarına faydalı olabilecek yeni bir yol sağladı.Bu çalışmada KLK geninde tespit edilen ve Sanger dizilemeyle doğrulanan mutasyon c.245C>A (p.A82D) CRISPR/Cas9 teknolojisi kullanılarak nakavt edilmiştir.Bu çalışmada, gelecekte kanser tedavisinde CRISPR sisteminin umut veren sonuçlarını göstemek için, yapılan gen düzenlemesi Doxorubicin ve PARP inhibitörü kullanılarak tripan mavisi ile hücre canlılığı, MTT testi ve koloni oluşumu gibi çeşitli sitotoksisite deneyleri ile değerlendirilmiştir.