Kolon kanseri tanılı olgularda PCR-RFLP metodu ile p53 gen mutasyonlarının saptanması

Kolon kanseri sporadik veya kal-tsal olabilen yayg-n bir hastal-kt-r. Kanserolu.umunda etkili olan en önemli tümör süpressör gen p53'dür. Normal p53replikasyon s-ras-nda DNA tamirini kolayla.t-rarak hücre siklusunu G1'de durmas-naveya apoptosise (programlanm-. hücre ölümü) neden olmas-nda rol oynar. Arg72Propolimorfizm kolorektal kanserin erken evrelerinde ve belki cinsiyete ve bölgeye ba=l-olarak invasiv hastal-=a ilerlemede rol oynayabilir. p53 intron 6'daki nükleotitde=i.imleri tümör geli.iminde ve p53 fonksiyonun düzensizli=iyle ili.kili oldu=urapor edilmi.tir. G13964C baz de=i.imi missense, nonsense ve splice bölgemutasyonu benzer dominant mutasyon olarak görev yapar.Çal-.mam-zda 35 (20 kad-n ve 15 erkek) kolon kanser te.hisi konmu. kolon kanserdoku örneklerinden DNA izole edildi. Dokular- ya.lar- 40-90 aras-nda kad-n (ya.ortalamas- 65.95±2.76) ve ya.lar- 40-79 aras-ndaki erkek olmak üzere (61.67±3.07)Ikolon kanserli 35 olgudan topland-. Parafine gömülü dokudan, EZNA Doku DNAKiti kullanarak, genomik DNA elde edildi. G13964C (intron 6) varyant-n- belirlemekiçin PCR-RFLP metodunu kullan-ld-. p53 4. eksonu PCR metodu ile amplifiye ettikve BstFNI restriksiyon enzimi kullanarak 4. ekson için p53 mutasyon analizibelirlendi. p53 6. varyant-n- PCR metoduyla amplifiye ettik ve BstHHI enziminikullanarak 6. intron için p53 mutasyonunu saptand-. Arg72Pro polimorfizmi için 2(%7.4) olguda Pro/Pro, 14 (%51.9) olguda Arg/Arg ve 11 (% 40.7) olguda Arg/Progenotiplerini bulundu. G13964C polimorfizmi için 7 (%23.3) olguda GG, 21(%70.0) GC ve 2 (%6.7) olguda CC bulundu.2006, 126 sayfaAnahtar Kelimeler: Kolon kanseri, p53 geni, Ar72Pro, G13964C, PCR, RFLP,mutasyon, polimorfizm.II