Koyun dalak doku arginazının bazı kinetik özellikleri

Bu çalışma ile koyun dalak doku arginazının bazı kinetik özellikleri ilk kez laboratuarımızda optimize edilmiştir.Koyun dalak doku arginazı için preinkübasyon ısısı 58 °C, preinkübasyon zamanı 13 dakika, inkübasyon zamanı 10 dakika ve optimum pH 9.5 olarak saptanmıştır. Enzim en yüksek aktiviteyi 2 mM MnCl2 konsantrasyonunda vermiştir. Sonuç olarak enzimin aktivasyonu için Mn+2 iyonlarının ve 58 °C' de preinkübasyonun gerekli olduğu tespit edilmiştir. Koyun dalak doku arginazının L-arginine karşı olan Km' i 6 mM olarak saptanmıştır.L- ornitin ve L- lizin gibi L- amino asitler enzim aktivitesini non-kompetetif inhibe etmiştir. Guanidino bileşiklerinden L- kanavanin enzimi non-kompetetif olarak inhibe etmektedir.EDTA, NEM, p-CMBA ve metilen mavisinin koyun dalak doku arginaz aktivitesini önemli ölçüde düşürdüğü gözlenmiştir. EDTA enzimi kompetetif inhibe ederken diğerleri non-kompetetif inhibe etmektedir. Koyun dalak doku arginazının yaklaşık % 50' sinin hücre çekirdeğinde, diğer % 50' sinin de sitoplazmada lokalize olduğu tesbit edilmiştir.Farklı ışık koşullarında metilen mavisinin arginaz aktivitesi üzerine olan etkisi araştırılarak metilen mavisinin, ışığın ve MnCl2' ün koyun dalak doku arginazının fotoinaktivasyonuna olan etkileri saptanmıştır.Anahtar Kelimeler: Arginaz , kinetik özellikler, koyun dalak dokusu.