BRPF proteinlerinin prostat kanserinde taksan direncini geri çevirmedeki moleküler mekanizması

Prostat kanseri (PKa), erkeklerde kansere bağlı ölümlerin önemli bir nedenidir. Lokalize PKa, androjen baskılama ve cerrahi ile tedavi edilebilir, ancak birçok hasta kastrasyona dirençli PKa (KDPKa) aşamasına ilerler, bu da daha agresif ve/veya metastatik bir durumdur. KDPKa hastaları için standart tedavi yöntemi taksanlardır (özellikle Doksetaksel ve Kabazitaksel), ancak bu ilaçlara karşı direnç zamanla gelişir. Taksan direnci, taksanların klinik uygulamasını etkisiz hale getirir. Kanserdeki epigenetik düzenlemeler, tümör gelişimi ve ilerlemesini etkilediği gibi kemoterapiye karşı direnci de etkiler. Bu nedenle, epigenetik mekanizmalara yönelik hedefleme, ilaç direncinin önüne geçmek için alternatif bir strateji olarak görünmektedir. Daha önce yapılan çalışmalar, bir epigenetik ilaç kütüphanesi ve epi-hedefli CRISPR taramaları kullanarak, BRPF proteinlerinin (bromodomain grubu içeren epigenetik okuyucu proteinler) inhibisyonunun, taksan direncini, taksan dirençli KDPKa hücrelerde (Du145 ve 22Rv1) etkin bir şekilde tersine çevirdiğini göstermiştir. Bu amaçla, BRPF'ler aracılığıyla taksan direncinin tersine çevrilmesinde yer alan moleküler yolları, taksana dirençli KDPKa hücrelerinde aydınlatmayı amaçladık. Bu tezde, RNA dizileme, kromatin immünopresipitasyonu, biyoinformatik ve genom düzenleme yöntemleri gibi çeşitli yaklaşımlar, BRPF proteinlerinin taksana dirençli KDPKa'daki biyolojik önemini karakterize etmek için kullanıldı. Küçük moleküllerle BRPF inhibisyonu, taksana dirençli KDPKa hücrelerini hem Doksetaksel hem de Kabazitaksel'e tekrar duyarlı hale getirdi. Hem BRPF1 hem de BRPF2'nin etkin bir şekilde susturulması, taksan direncini tersine çevirmeye yardımcı oldu, ancak sadece hafif bir etki gözlendi. Öte yandan, BRPF2'nin genetik knockout'u etkin bir şekilde taksan direncini tersine çevirdi. BRPF1, dirençli hücrelerin hayatta kalması için önemliydi, bu nedenle dirençli hücrelerde BRPF1 knockout'u çeşitli denemelere rağmen gerçekleştirilemedi. Ayrıca, BRPF'lerin sessizleştirilmesi veya knockout'u, permeabilite glikoprotein (Pgp) kodlayan ABCB1'in ifadesini düşürdü ve fonksiyonunu baskıladı, bu da hücrelerin taksan tedavisine yeniden duyarlı hale gelmesinin potansiyel bir açıklaması olabilir. Bu baskılama, ChIP-qPCR analizi doğrultusunda BRPF1'in doğrudan ABCB1 promotörüne bağlanmasıyla açıklanabilir. Ayrıca, taksana dirençli KDPKa hücrelerinde ABCB1'in promotör bölgesinde H3K27 asetilasyonunun mevcut olduğunu gözlemledik. Sonuç olarak, bu çalışmada BRPF aracılı ilaç direncinde yer alan moleküler oyuncular ortaya çıkarılmıştır. BRPF inhibisyonu, taksan direnci gösteren KDPKa'da umut verici bir kanser karşıtı strateji olarak görünmekte ve mekanizma, taksanın hücre dışına pompalanmasının inhibisyonunu içermektedir. BRPF inhibisyonu, taksana dirençli KDPKa'ya karşı etkili tedavilerin geliştirilmesinde kullanılabilir. Anahtar kelimeler: BRPF, kastrasyona dirençli prostat kanseri, ilaç direnci, epigenetik, taksan direnci.