Ouabain ile indüklenen senesens ve RHO kinaz arasındaki olası ilişkinin incelenmesi

Son yıllarda kanser tedavisinde yeni bir yaklaşım olarak ilaçla indüklenen senesens önem kazanmıştır. Yapılan çalışmalar kardiyak glikozitlerin senesense yol açtığını göstermiştir. Diğer taraftan aktif Rho-GTPazların senesent hücre morfolojisinin gelişiminde rol aldıkları bulunmuştur. Ayrıca Rho nun down stream efektörü olan Rho kinazın endotel hücrelerindeki inhibisyonunun Notch ile indüklenen hücresel senesensi geri çevirdiği bildirilmiştir. Bu çalışmada HeLa hücrelerinde bir kardiyak glikozit olan ouabain ile oluşturulmuş senesenste Rho kinazın olası rolü araştırılmıştır. Ouabainle indüklenmiş senesensi belirlemek için, xCELLigence gerçek zamanlı hücre analiz sistemi, senesens ilişkili-ß-galaktozidaz boyaması, hücre siklus analizi ve hücre alanı ölçümleri kullanılmıştır. HeLa hücrelerinde ouabainin doz bağımlı etkisi incelendi. Hücre ölümü ile sonuçlanan yüksek konsantrasyondaki ouabain tedavisinin aksine; düşük konsantrasyonlardaki ouabain tedavisinin senesensi indüklediği gözlemlenmiştir. Spesifik Rock inhibitörü Y-27632 preinkübasyonu (10?M, 30dk) hücrelerde ouabainle (30nM, 48sa) indüklenen-senesensi inhibe etmemesine rağmen; hücre alanını azaltmıştır. Ayrıca Y-27632 preinkübasyonu ouabainle indüklenmiş senesent hücrelerin ölümünü hızlandırmıştır. 30nM ouabain uygulanmasının HeLa hücrelerinde siklusu G2/M fazında durdurduğunu ve Y-27632 preinkübasyonunun değişikliğe neden olmadığını gözlemlendi. Sonuçlarımız; 10?M Y-27632 ile 30nM ouabain kombinasyonunun, senesens oluşumunu engellemezken hücre ölümünü hızlandırdığını göstermektedir. Bu sonuçlar, kanser tedavisinde Rho kinazın, ouabainle indüklenen senesens için önemli bir terapötik hedef olduğunu göstermektedir. Film 1 ve film 2 adlı video dosyaları ektedir.