Polimer modifiyeli silika nanopartiküllerin enzim immobilizasyonunda kullanımı

Bu çalışmada, asetilkolinesteraz enzimi (E.C. 3.1.1.7) polietilenimin (PEI) ve 3-aminopropiltrietoksisilan (APTES) kullanılarak modifiye edilen silika nanopartiküllere kovalent bağlanma ile immobilize edilmiştir. Serbest ve immobilize enzimler üzerine pH, sıcaklık, depolama kararlılığı gibi çeşitli parametrelerin etkileri incelenmiştir. Optimum pH serbest enzim, APTES ve PEI ile modifiye edilmiş silika nanopartiküller için sırasıyla 7, 7 ve 8 olarak bulunmuştur. Optimum sıcaklık serbest enzim, APTES ve PEI modifiye edilmiş silika nanoparitküller için sırasıyla 30 oC, 30 oC ve 35 oC olarak belirlenmiştir. Serbest enzim için Km ve Vmak değerleri sırasıyla 6,35x10-3 M ve 5,00x10-4 M.dak-1 ve APTES ve PEI modifiye edilmiş silika nanopartiküllere immobilize enzimler için ise Km değerleri 1,19x10-2 M, 2,1x10-2 M ve Vmak değerleri 3,09x10-3 M.dak-1, 1,42x10-3 M.dak-1 arasında bulunmuşturAsetilkolinesterazın tekrar kullanım sayısı ve depolama kararlılığı immobilizasyonu ile arttırılmıştır.