Isolation and characterization of primary human brain mural cells

Perisitler ve düz kas hücreleri, kan damarlarının abluminal tarafında bulunan mural hücrelerdir. Merkezi sinir sisteminde, perisitler, kan beyin bariyerinin bütünlüğünün korunmasında ve serebral kan akışının düzenlenmesinde rol oynar. Son çalışmalar, perisitlerin ayrıca immün düzenleyici işlevlere sahip olduğunu da göstermektedir. Enflamatuar uyaranlara yanıt olarak perisitlerde, proinflamatuar sitokinler ve kemokinlerin ve VCAM-1 ve ICAM-1 gibi hücre adezyon moleküllerinin ekspresyonunun arttigi gösterilmiştir. Transgenik hayvan modellerinde, perisit kaybı kan beyin bariyerinin geçirgenliğinin ve merkezi sinir sistemine immun hucre infiltrasyonunun artmasina yol açar. Öte yandan, perisitlerin tümör mikroçevresindeki rolleri arastirildiginda, tümörle ilişkili perisitlerin, immun baskilayici bir rol ustlenip tümörün ilerlemesini destekleyebileceği gösterilmiştir. Bu nedenle, perisitlerin bağışıklık sistemi ile olan etkileşimlerini araştırmak, immünomodülatör tedaviler için potansiyel hedefler olabilecek hastalık mekanizmalarını ortaya çıkarabilir. Bununla birlikte, perisitler, duz kas hücreleri ve fibroblastlarin çok benzer bir moleküler yapiya sahip olmalari, bu mural hücreleri in vivo olarak da in vitro olarak da incelemeyi zorlu kilar. Bu çalışmada beyin perisitlerinin immun ozellikleri su yönleri ile arastirilmistir: (i) literatürde yer alan iki farklı yöntem kullanılarak ameliyat sırasında elde edilen dokudan birincil insan beyin perisit hücreleri üretilerek, (ii) bu primer hucrelerin moleküler özelliklerini ticari olarak temin edilebilen insan beyni perisiti ve insan beyni fibroblasti hücre hatlari ile karşılaştırılarak, (iii) primer insan beyni perisitlerinin enflamatuar sitokinlere yanıt olarak gen ekspresyonlarinda olusan değişiklikleri belirleyerek, (iv) kemotaksis deneyleri yoluyla in vitro insan beyni perisit - T lenfosit etkileşimlerini inceleyerek ve (v) CRISPR/Cas9 yolu ile CXCL10suz (knock-out) insan beyni perisiti hücre hatti oluşturarak CXCL10'nun insan beyni perisitlerinin T hücrelerle olan etkilisimindeki rolunu inceleyerek. Bu bağlamda elde ettiğimiz veriler beyin perisitlerinin potansiyel bir proinflamatuar rol oynayabildigine işaret etmektedir; bu nedenle, merkezi sinir sistemine T lenfosit infiltrasyonunda oynadiklari belirli yolları anlamak, bu yolların nöroinflamatuar durumlardaki müdahaleler için tedavi hedefi olarak kullanilip kullanilamayacagini belirlememize yardımcı olabilir.