Thermobacıllus sp. vo15 ve bacıllus lıchenıformıs vo14'den termostabıl alfa-amılaz ve ksılanaz enzımlerının üretımı ve karakterızasyonu

Bu çalışmada, Billoris (Sağlarca, Siirt) sıcak su kaynağından izole edilen termofilik izolatlar VO15 ve VO14 kullanılmış ve derin kültür fermentasyonuyla, termofilik bakteriler tarafından ekstraselular alfa-amilaz ve ksilanaz enzimleri için optimum üretim koşullarının belirlenmesi amaçlanmıştır. Alfa-amilaz için optimum üretim koşulları inkübasyon zamanı, sıcaklık ve pH Thermobacillus sp.VO15 için 48 saat (12.53 U/mg), 40°C ve pH 6.0 olarak, B.licheniformis VO14 için 24 saat (15.98 U/mg), 45°C ve pH 7.0 olarak elde edilmiştir. Ksilanaz için optimum üretim koşulları inkübasyon zamanı, sıcaklık ve pH Thermobacillus sp.VO15 için 24 saat (28.24 U/mg), 45°C ve pH 6.0 olarak, B.licheniformis VO14 için 24 saat (32.52 U/mg), 40°C ve pH 5.0 olarak elde edilmiştir. Azot kaynakları arasında maksimum alfa-amilaz üretimi Thermobacillus sp için amonyum sülfat (117.6%) ve B.licheniformis için maya ekstraktından (122.44%) elde edilmiştir. Surfaktant olarak Tween-40 kullanıldığında her iki bakteride de alfa-amilaz ve ksilanaz enzimlerinin üretiminde artiş kaydedilmiştir. Sıcaklık ve pH, sıcaklık ve pH stabiliteleri, NaCl, deterjanlar, surfaktantlar ve metal iyonlarının enzim karakterizasyonuna etkisi gibi değişik parametreler test edilmiştir. Ayrıca farklı nişastaların alfa-amilaz tarafından parçalanmaları çalışılmıştır. 50ºC - 110ºC sıcaklık değerlerinde enzimlerin sıcaklık stabiliteleri karşılaştırılmıştır. Thermobacillus sp.VO15 tarafından üretilen alfa-amilazın 110ºC'de 30 ve 240 dakika ön inkübasyona bırakılmasından sonra enzim aktivitesini sırasıyla %95 ve %80 oranında koruduğu gözlenmiştir. Her iki bakteriden elde edilen alfa-amilazın Cd+2 ve Hg+2 tarafından aşırı şekilde inhibe edildiği, Co2+ tarafından aktive edildiği tespit edilmiştir.