Pseudomonas fluorescens (NRRL B-2641) ile pektinaz üretiminin incelenmesi

Bu çalışmada, kesikli sistemde Pseudomonas fluorescens ile pektin liyaz, ekzo pektinaz ve endo pektinaz üretimi gerçekleştirilmiş ve enzim üretimine başlangıç pH' ı, başlangıç pektin derişimi, farklı azot kaynakları ve metal tuzlarının etkileri incelenmiştir. Daha sonra farklı tarımsal atıklar kullanılarak katı hal fermantasyonu ile enzim üretimi yapılmış ve pektinaz grubu enzimlerin üretiminde kullanılabilecek tarımsal atıklar belirlenmiştir. Çalışmanın ilk kısmında derin kültür fermantasyonu deneyleri yapılmış ve pektin liyaz, ekzo pektinaz ve endo pektinaz üretimine başlangıç pH' ının etkisi araştırılmış, maksimum enzim üretimi pH : 8' de elde edilmiştir. Başlangıç pektin derişiminin enzim üretimine etkisinin araştırılması amacıyla, pektin derişimi % 0.5-1.5 (w/v) aralığında değiştirilmiştir. % 1 (w/v) pektin derişimi optimum pektin derişimi olarak belirlenmiştir. Daha sonra farklı azot kaynaklarının etkisi incelenmiş; amonyum sülfat, maya özütü ve pepton azot kaynağı olarak kullanılmıştır. En yüksek aktivite % 0.14 amonyum sülfat içeren ortamda elde edilmiştir. Derin kültür fermantasyonu deneylerinin son bölümünde farklı metal tuzların etkileri araştırılmış ve % 0.02 (w/v) derişiminde ZnSO4.7H2O, MnSO4.H2O, FeSO4.7H2O, CaCI2.2H2O, NaCl, CuSO4.5H2O bu amaç için kullanılmıştır. En yüksek aktivite değerleri % 0.02 (w/v) ZnSO4.7H2O içeren ortamda elde edilmiştir. Araştırmanın ikinci aşamasında pektin liyaz, ekzo pektinaz ve endo pektinaz enzimleri-nin aktivitelerine sıcaklık ve pH' ın etkisi incelenmiştir. Bu amaçla pH 6-11 aralığında değiştirilirken sıcaklık ise 30-70 oC aralığında değiştirilmiştir. Pektin liyaz, ekzo pektinaz ve endo pektinaz aktiviteleri için optimum pH sırasıyla 8, 10 ve 9 olarak; optimum sıcaklıkları ise sırasıyla 50, 40 ve 40 oC olarak belirlenmiştir. Çalışmanın son kısmında katı hal fermantasyonu deneyleri yapılmıştır. Bu amaçla, buğday kepeği, şeker pancarı küspesi, ay çekirdeği tablası, portakal kabuğu, muz kabuğu ve elma posası gibi çeşitli tarımsal atıklar kullanılmış ve en yüksek pektin liyaz aktivitesi şeker pancarı küspesi, ekzo pektinaz aktivitesi elma posası ve endo pektinaz aktivitesi ise portakal kabuğu içeren ortamlarda elde edilmiştir.