Safra asidinin neden olduğu hepatotoksisiteye karşı C3A hücre hattında propolis ekstraktının olası koruyucu etkilerinin araştırılması

Kolestaz, bilier basıncın artması, safra kanalının tıkanması ve safra tuzlarının karaciğer içinde birikimiyle karakterize patofizyolojik bir durumdur. Propolis, polifenolik bileşikler ve flavonoidler açısından zengin, antitümöral, antiinflamatuar, antioksidatif, antimutajenik özellikleri araştırılmış bir arı ürünüdür. Çalışmamızda Propolis ekstraktının safra asit kaynaklı hepatotoksisiteye karşı hepatosit canlılığı üzerine olası koruyucu etkinliğinin araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmada insan hepatoma hücre hattı olan C3A kullanıldı. Hücreler %10FCS, %1antibiyotik içeren DMEM/F12 hücre medyumunda %5CO2, 37°C'lik nemli atmosfer altında çoğaltıldı. Çoğalan hücreler tripsin/EDTA ile toplandı ve hemositometreyle sayıldı. 3x104 hücre/100µl konsantrasyonda 96 kuyucuklu plakaya ekildi. Hücrelerin tamamının plakaya yapışması için 1 gün beklendi. Hücrelerin üzerine glikokenodeoksikolik safra asidi(GCDCA) (0.5, 0.75, 1, 1.5, 2mM) uygulandı (n=3). Safra asidi uygulamasından 24 saat sonra MTT testi kullanılarak etkili toksik dozun 1mM olduğu belirlendi. Etkin dozu belirlenen safra asidi uygulamasından 3 saat önce ve sonra propolis ekstraktının etanolde ve suda çözünmüş hali 50, 10, 5, 1µg/ml olarak uygulandı. Olası koruyucu etkileri 24 saat sonra MTT testi kullanılarak ölçüldü. Hücreler üzerine uygulanan etanol oranı %0.05'in altında tutuldu. Hücre morfolojileri akridin turuncusuyla boyanarak florasan mikroskopla değerlendirildi. Propolis ekstraktlarının tek başına hücreler üzerinde kontrol grubuyla kıyaslandığında anlamlı bir etki oluşturmadığı görüldü(p>0.05). 1mM GCDCA toksisitesinden önce uygulanan propolis su ekstraktının bütün dozlarında, 1mM GCDCA toksisitesinden sonra ise propolis su ekstraktının sadece 50 ve 10µg/ml hücre canlılığını anlamlı derecede artırdığı görüldü(p<0.05). 1.5mM GCDCA toksisitesinden önce uygulanan propolis su ekstraktının ise 50 ve 10µg/ml dozlarının hücre canlılığı üzerine olumlu etkisi olduğu görüldü(p<0.05). 1mM GCDCA'yla indüklenmiş toksisiteden önce ve sonra uygulanan propolis alkol ekstraktının sadece 1µg/ml dozunun olumlu etkisi olduğu görüldü(p<0.05). 1.5mM GCDCA ile indüklenmiş toksisiteden önce ve sonra uygulanmış propolis alkol ekstraktının hücre canlılığına olumlu bir etkisi görülmedi(p>0.05). Kolestazis ameliyatları öncesi bekleme süresinde karaciğerin korunmasına yönelik henüz yeterli bir tedavi yaklaşımının bulunmamasından ve bu çalışma ile propolisin in-vitro olarak koruyucu etkisinin görülmesinden dolayı bu konuda yapılacak in-vivo çalışmalar değerli olacaktır.