Potential regulatory effects of fluidic shear stress through C-met signalling on biological behaviours of hepatocellular carcinoma cells

Tümör metastazı kanser ile ilişkili ölümlerin en yaygın nedenidir. Bir tümörün metastaz yapabilmesi için primer tümörden ayrılarak dolaşıma geçmesi, dolaşımda sağ kalması, hedef organda yerleşerek çoğalması gerekmektedir. Solid tümörlerde kan akımı, doku ve lenf sıvılarına bağlı ortaya çıkan mekanik stres-sıvı teğetsel gerilme stresi (fluidic shear stress :FSS) tümör hücrelerinin proliferasyonunda, apoptoz, otafaji, invazyon ve metastaz gelişiminde önemlidir. Birçok klinikopatolojik çalışma, hepatoselüler karsinomada (HCC) intravasküler yayılımın kötü prognostik faktör olduğuna ve metastaz oluşumundaki önemine dikkati çekmektedir. Tümör hücreleri sinüzoidlere veya kan dolaşımına geçerek FSS ile karşılaştığında genelde anoikis veya mekanik travma nedeniyle ölmektedir. HCC'de intrahepatik metastazın yaygın olduğu, metastazın genelde invazyon bağımsız olarak gerçekleştiği, gerek intrahepatik gerekse ekstrahepatik metastaz için FSS'de sağkalımın kritik bir basamak olduğu bildirilmiştir. Ancak bu sürecin mekanizmaları ile açıklandığı yeterince çalışma bulunmamaktadır Daha önceki çalışmalarımız Hepatosit Büyüme Faktörü (HGF) /c-Met yolağının HCC'de hücre sağkalımı, invazyon ve metastazı düzenlediğini göstermiştir. Bu çalışmada, HGF/c-Met yolağının, FSS varlığında HCC hücrelerinin sağkalımındaki rolünü araştırdık. Bu amaçla mikroakışkan bir sistem kullanarak c-Met ekspresyonu yüksek (SNU-449) ve düşük olan (HuH-7 ve HepG2) HCC hücre hatlarında, c-Met'in aktive ve inhibe edildiği koşullarda, FSS uyguladık. c-Met ekspresyon ve aktivasyonu qRT-PCR ve WB, sağkalım ve proliferasyonu tripan mavisi, (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, a tetrazole) (MTT) ile zaman bağımlı olarak inceledik. Ayrıca FSS'nin koloni oluşumu ve epitelyal mezenşimal dönüşüme (EMT), motilite ve invazyonuna etkisini belirledik. Verilerimiz FSS koşullarının HCC hücrelerinde EMT fenotipini uyardığını; c-Met ekspresyon ve aktivasyon düzeyinin yüksek olduğu FSS varlığında sağkalımın, adhezyon ve proliferasyon kapasitesinin daha yüksek olduğunu; c-Met aktivasyonunun bu etkiyi artırdığını, buna karşın spesifik olarak c-Met yolağını inhibe eden küçük molekül inhibitör (SU11274) uygulamasının ise bu etkiyi tersine çevirdiği gösterilmiştir. Çalışmamız, HGF-Met sinyal yolağının insan HCC hücrelerinin FSS varlığında sağkalımında ve daha agresif karakter kazanmasında kritik bir role sahip olduğunu, c-Met'i bloklayan inhibitörlerinin, dolaşımdaki tümör hücrelerinin sağkalımının veya HCC de metastazın engellenmesinde kullanılabileceğini düşündürmektedir.