Spirulina platensis'ten süperoksit dismütaz (SOD) enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu

Bu çalışmada, Spirulina platensis'ten Süperoksit Dismutaz(SOD) enzimi saflaştırılmıştır. Enzimin saflaştırılmasında, Spirulina platensis hücrelerinin sonikatör ile homojenizasyonu, amonyum sülfat çöktürmesi, DEAE selüloz anyon değiştirici kromatografisi basamakları sırasıyla uygulanmış ve her basamak sonrasında aktivite ve protein değerleri belirlenmiştir. Bu işlemler sonrasında SOD homojenata göre %81 verim ile 315 kat saflaştırılmıştır.SOD `ın maksimum aktivite gösterdiği sıcaklık 5°C olarak hesaplanmıştır. Vmax ve Km değerleri sırasıyla 722 U/mg prot. ve 0,23 mM ksantin olarak belirlenmiştir. Saflaştırılan SOD'ın 5°C ve oda sıcaklığında, tris baz tamponu (pH 7,8, 50 mM), %30 ve %50 (v/v) gliserol içeren çözeltilerdeki depolama kararlılığı araştırılmıştır. 20 günün sonunda oda sıcaklığında ve tris baz tamponu içerisinde depolanan SOD başlangıç aktivitesinin neredeyse tamamını kaybetmiştir. Buna karşın tris tamponu içerisinde 5°C'de depolanan SOD başlangıç aktivitesinin yaklaşık %50'si korunmuştur. %30 ve %50 gliserol içerisinde 5°C'de depolanan SOD ise başlangıç aktivitesinin sırasıyla yaklaşık %81 ve 77'sini korumuştur. Spirulina platensis SOD'ının 5, 40 ve 50°C'deki termal kararlılığı da araştırılmıştır.