Süperoksit dismutaz enziminin insan eritrositlerinden saflaştırılması ve bazı pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkisinin incelenmesi

Süperoksit Dismutaz (SOD), (E.C:1.15.1.1) süperoksitin hidrojen perokside dismutasyonunu katalizler. Bu çalışmada, SOD, DEAE-Selüloz kromatoğrafisi ve bakır-iminodiasetik asit-agaroz kromatoğrafisi kullanılarak izole edilmiştir. Enzim % 33,8 verimle 196,3 kat saflaştırılmıştır. Vmax ve Km sırasıyla 5000 U/mg prot. ve 3.10-3 mM ksantin olarak bulunmuştur. Optimum sıcaklık, 15 °C (288 K) olarak belirlenmiştir. Depolama kararlılığı araştırılmıştır. Aktivasyon enerjisi 16,856 kj/mol, denatüre olmaya başlanan sıcaklık 19 °C (292 K) olarak hesaplanmıştır. Geri dönüşüm sayısı (kcat) ve katalitik etkinlik (kcat/Km ) sırasıyla 1667 s-1 ve 555 667 s-1. mM-1 Ksantin-1 olarak bulunmuştur. SOD'nin moleküler ağırlığı 20 000 olarak saptanmıştır. Cyprodinil'in SOD'yi yarışmalı (kompetitif) olarak inhibe ettiği, Fludioxonil'in ise SOD'yi yarışmasız (non-kompetitif) olarak inhibe ettiği bulunmuştur. Anahtar Kelimeler: Süperoksit Dismutaz, Saflaştırma, Eritrosit, Cyprodinil, Fludioxonil.