İnsan retinal pigment epitelyal hücre hattında resveratrol ve nikotinamid'in hücre çoğalması ve apoptozise etkilerinin araştırılması

Yaşa bağlı makula dejenenasyonu (YBMD) metabolik, fonksiyonel, genetik ve çevresel faktörlerin etkilediği, patogenezinde oksidatif stres kaynaklı retinal pigment epitelyum (RPE) hasarın sorumlu olduğu ve özellikle kuru tipinde kesin bir tedavi yöntemi olmayan bir hastalıktır. Muhtemel tedavi seçeneği olarak, antioksidan, antiapoptotik ve antiinflamatuar özellikleri aracılığıyla mitokondriyal disfonksiyonu azaltarak aditif yada sinerjik etkisi olabileceği düşünülen resveratrol ve nikotinamid'in kuru tip YBMD modelindeki potansiyel etkinliğinin gösterilmesi amaçlandı. Bu çalışmada YBMD modeli oluşturmak için, sağlıklı RPE hücreler standart seviyede oksidatif strese maruz bırakıldı. Etken maddelerin belirlenen konsantrasyonlarda ve sürelerde ayrı ayrı ve kombinasyon halinde sağlıklı ve oksidatif strese maruz bırakılmış hasarlı RPE hücrelerine uygulanmasının hücre çoğalmasına olan etkisi CCK-8 analizi ile ölçüldü ve aynı parametrelerin apoptoz analizi ise flow sitometri yöntemi ile belirlendi. Bu analizlerde, her iki etken madde için en iyi sonucu veren etkili dozlar ve kombine dozun, SIRT1 gen ifade düzeyi üzerindeki etkisi Kantitatif Real-Time PCR yöntemi ile belirlendi. Veriler istatistiksel açıdan değerlendirildi. Etken maddeler ve kombine doz seçenekleri arasında, YBMD modelindeki progresyonun azalması yönünde, en etkili hücre viabilite (p<0,001), hücre proliferasyon indeksi (p<0,001) ve hücre apoptoz+nekroz değerlerinin (p<0,001) 72.saat inkübasyon süresinde 100µmol/L resveratrol+1mM/L nikotinamid kombine doz uygulamasında gerçekleştiği tespit edildi. İlgili kombine dozun sağlıklı RPE hücre grubunda sitotoksik etki göstermediği (p>0,05) ve yara onarımını sağlayacak düzeyde proliferatif etki sağladığı (p=0,01) görüldü ve ayrıca hasarlı RPE hücre grubunda SIRT1 gen ekspresyon seviyesini arttırdığı belirlendi (p<0,001). Araştırmamızda etken maddelerin ayrı ayrı uygulamalarına kıyasla kombine doz uygulamalarının, hücre proliferasyonunu, hücre viabilitesini ve SIRT1 gen ifade düzeyini etkili bir şekilde arttırdığı ve hücre apoptoz+nekroz oranını ise etkili bir şekilde azalttığı görüldü ve iki etken maddenin sinerjik etki gösterdiği belirlendi. Proje araştırmamız, ilgili kombine dozun kuru tip YBMD modelindeki etkisini araştıran ilk çalışmadır. Anahtar Sözcükler: Resveratrol, Nikotinamid, Kuru tip yaşa bağlı makula dejenerasyonu