Torsiyon-detorsiyon oluşturulan sıçan testis dokusunda apoptozis ve Transient reseptör potansiyel melastatin-7 (TRPM-7) katyon kanallarının ekspresyonu üzerine İloprost'un etkileri

Torsiyon, spermatik kord ve korda ait yapıların kendi etraflarında dönmesi ile oluşur. Testis kan akımının bozulmasıyla karakterize olan bir durum olan torsiyon acil cerrahi girişim gerektiren önemli bir ürolojik sorundur ve 25 yaşından önce görülme sıklığı yaklaşık 1/4000'dir. Transient Reseptör Potansiyel Melastatin-7 (TRPM-7) ilk kez Nadler ve arkadaşları tarafından klonlanmıştır. Endotelyal hücrelerde, monositlerde, nöronlarda, osteoblastlarda, mezenkimal kök hücrelerde ve vasküler düz kas hücrelerinde TRPM-7 ekspresyonu olduğu bilinmektedir. Bu kanal katyonlara karşı (özellikle kalsiyum ve magnezyum) seçici olmayan bir katyon kanalıdır. Kanalın hücre proliferasyonunda etkili olduğu saptanmıştır. İloprostun sentetik analoğu olan epoprostenolün keşfi ardından 1978 de iloprost üretilmiştir. Biyolojik olarak aktif mediatör olan epoprostenol düz kas hücrelerinden, bazı bağ doku ve kan hücrelerinden salınır. Epoprostenoller doymamış bir yağ asidi olan araşidonik asit metabolizması sonucu ortaya çıkan ürünlerdir. Epoprostenol aktif bir metabolittir. Damarın düz kas tabakasında siklik adenozin monofosfat (cAMP) konsantrasyonunu arttırır, kan pulcuklarının kümelenmesini engeller ve damarlarda dilatasyona neden olur. Çalışmada 8-10 haftalık, 35 adet erkek Sprague-Dawley sıçan kullanıldı. Kullanılan deney hayvanları her grupta 7 hayvan olacak şekilde 5 gruba ayrıldı. Kontrol grubuna deney süresince herhangi bir işlem uygulanmadı. Sham grubundaki sıçanların batınları açılarak sol testis dışarı alındı. Herhangi bir işlem uygulanmadan 60 dakika boyunca bekletildikten sonra batına yerleştirilerek kapatıldı. İloprost grubuna intraperitoneal (i.p) tek doz 2 mcg/kg iloprost uygulandı. Torsiyon-detorsiyon grubundaki sıçanların batınları açılarak sol testis dışarı alındı. Daha sonra saat yönünün tersine 7200 döndürülerek sabitlendi ve torsiyon meydana getirildi. 60 dakika boyunca bekletildikten sonra detorsiyon yapılan testis batına yerleştirilerek kapatıldı. Torsiyon-detorsiyon+iloprost grubundaki sıçanların batınları açılarak sol testis dışarı alındı. Daha sonra saat yönünün tersine 7200 döndürülerek sabitlendi ve torsiyon meydana getirildi. 60 dakika boyunca bekletildikten sonra tek doz 2 mcg/kg i.p olarak uygulanıp detorsiyon yapılan testis batına yerleştirilerek kapatıldı. Tüm gruplardaki sıçanlar 48 saatlik deney süresi sonunda anestezi altında dekapite edilerek doku ve kan örnekleri alındı. Dokular rutin histolojik takip serilerinden geçirilerek parafin bloklara gömüldü. Parafin bloklardan alınan kesitlere histopatolojik değerlendirme için Hematoksilen&Eozin (H&E) boyama, apoptozis için TUNEL metodu ve TRPM-7 immünreaktivitesi için avidin-biotin-peroksidaz yöntemi uygulandı. H&E boyamanın ışık mikroskobu altında incelenmesi sonucu; kontrol, sham ve iloprost gruplarına ait testis dokuları normal olarak değerlendirildi. Kontrol grubuyla kıyaslandığında torsiyon-detorsiyon ve torsiyon-detorsiyon+iloprost gruplarında histopatolojik değerlendirme skorunu oluşturan parametrelerde (ödem, germinal epitel dejenerasyonu, atipik rezidüel cisimler, germ hücre dökülmesi ve çok çekirdekli dev hücreler) istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde artış izlendi. Torsiyon-detorsiyon grubu ile kıyaslandığında ise torsiyon-detorsiyon+iloprost grubunda histopatolojik değerlendirme skorunda istatistiksel olarak anlamlı bir değişiklik izlenmedi. Testis dokusunda TUNEL pozitifliği ve TRPM-7 immünreaktivitesi; kontrol, sham ve iloprost gruplarında benzerdi. Kontrol grubuyla kıyaslandığında torsiyon-detorsiyon ve torsiyon-detorsiyon+iloprost gruplarında TUNEL pozitifliği ve TRPM-7 immünreaktivitesi istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde artmış olarak izlendi. Torsiyon-detorsiyon grubu ile kıyaslandığında ise torsiyon-detorsiyon+iloprost grubunda TUNEL pozitifliği ve TRPM-7 immünreaktivitesinde istatistiksel olarak anlamlı bir değişiklik izlenmedi. Sonuç olarak, deneysel torsiyon-detorsiyon oluşturulan testis dokusunda iloprostun kullanımının histopatolojik değerlendirme skoruna, TUNEL pozitifliğine ve TRPM-7 immünreaktivitesine herhangi bir etkisinin olmadığı görüldü. Gelecekte iloprost ile ilgili farklı doz ve sürelerde çalışmalara ihtiyaç olduğu kanaatine varıldı.