MAb proteinin saflaştırılması için anyon değişim kromatografisi yönteminin optimizasyonu

Farklı ligandlara ve farklı pH değerlerine sahip reçinelerin insan IgG4 proteini üzerindeki etkileri anyon değişim kromatografisi ile araştırıldı. İlk adımda, Protein A yakalama adımı kullanılarak büyük ölçüde saflaştırılmış monoklonal antikor proteinine, Anyon Değişim Kromatografisi adımı kullanılarak 4 farklı markaya ait 5 farklı pozitif yüklü ligandla reçine tarama çalışması uygulandı. Bu çalışmanın ardından tek bir reçine üzerinde farklı pH (6-7-8.1) değerlerinin izoelektrik noktası 6.9 olan bir IgG4 proteini üzerindeki etkisi araştırıldı. Reçine tarama sürecinde tüm protein kalite analizleri incelenerek en uyumlu ligandlı reçineye ulaşılması hedeflendi. pH değerlerinin antikor proteini üzerindeki etkisi üzerine yapılan çalışmalara göre, pH değeri 6,9'dan yüksek olduğunda proteinin farklı fragmanları uzaklaştırılmış ve protein yük varyantı üzerinde doğrudan etki oluşmuştur. anyon değişim kromatografisi flow through yöntemi ile protein pH değeri izoelektrik noktası değerine eşit veya altında incelendiğinde protein geri kazanımının %92-%98 maksimum değerde olduğu belirlendi.